| 研究課題/領域番号 |
22380111
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
中尾 実樹 九州大学, 大学院・農学研究院, 教授 (50212080)
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| 研究分担者 |
杣本 智軌 九州大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (40403993)
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| キーワード | コイ / ギンブナ / 補体 / C3 / 補体制御因子 / SCRモジュール / 精製 / cDNAクローニング |
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| 研究概要 |
本研究では、獲得免疫調節機能を担う補体制御因子・レセプターを魚類で同定・単離し、それらの抗体産生応答および細胞性の免疫応答に対する調節機能をギンブナおよびコイを用いて解析することを目的とした。ギンブナでは細胞性免疫応答などのアッセイ系が確立しているものの、補体関連の遺伝子やタンパク質はほとんど同定されていない。本年度は、まずギンブナの補体C3および各種制御因子のcDNAクローニングとタンパク質精製を目指した。コイで確立された精製法に準拠して、ギンブナ血清からPEG分画、Superdex200ゲルろ過、およびQ-Sepharose HPを用いた各種クロマトグラフィーによってC3を分離した。その結果、2種のC3アイソフォームを単離することに成功した。また、ギンブナ肝膵臓から、RACE法を用いて、7種のC3アイソフォームをコードするcDNAをクローニングした。これらは、結合反応特異性を規定するアミノ酸が異なる2グループに大別されたほか、コイでのみ見つかっている、短いアイソフォームも含んでいた。さらに、コイとゼブラフィッシュで同定されている、膜型補体制御因子Tecremの全長cDNAをクローニングすることにも成功した。ギンブナTecremには、構成するSCRモジュールの数が異なる3種のアイソフォームが見つかり、補体成分C3のみならず、制御因子も高度に多様化していることが判明した。以上の研究成果によって、ギンブナでC3と補体制御因子を用いた免疫応答制御を解析するための研究基盤が整えられた。
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