卵巣機能の解体と卵子形成機能の抽出・再構築による卵母細胞発育培養系の開発

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22380151
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用動物科学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 宮野 隆 神戸大学, 大学院・農学研究科, 教授 (80200195)
• 研究分担者: 平尾 雄二 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構, 畜産草地研究所, 上席研究員 (10355349)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 卵母細胞 / 卵巣 / 卵胞 / 体外培養

研究概要

ウシおよびブタの原始卵胞は,体外培養によって一次卵胞を超えては発達しなかった。ウシの二次卵胞内の卵母細胞は,血漿を添加した培養液中で発育した。ウシの初期胞状卵胞より採取した卵母細胞をポリビニルピロリドン,エストラジオール 17β およびアンドロステンジオンを含む培養液中で培養すると,卵母細胞は高率に発育し,成熟能力を獲得した。ブタの初期胞状卵胞より採取した卵母細胞を FSH,dbcAMP およびエストラジオール17β 添加した培養液中で培養すると,卵母細胞は高率に発育し,成熟する能力を獲得した。

研究成果

• [雑誌論文] Effect of androstenedione on the growth and meiotic competence of bovine oocytes from early antral follicles (2012)
  • 著者名/発表者名: Taketsuru H, Hirao Y, Takenouchi N, Iga K, Miyano T.
  • 雑誌名: Zygote 巻: 20巻 ページ: 407-415
  • DOI: DOI:10.1017/S0967199411000268
  • 査読あり
• [雑誌論文] Milrinone treatment of bovine oocytes during in vitro maturation benefits production of nuclear transfer embryos by improving enucleation rate and developmental competence. (2012)
  • 著者名/発表者名: Naruse K, Iga K, Shimizu M, Takenouchi N, Akagi S, Somfai T, Hirao Y.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 58巻 ページ: 476-483
  • DOI: DOI:10.1262/jrd.2012-010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Optimization of oxygen concentration for growing bovine oocytes in vitro: constant low and high oxygen concentrations compromise the yield of fully grown oocytes. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hirao Y, Shimizu M, Iga K, Takenouchi N.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 58巻 ページ: 2012
  • DOI: DOI:10.1262/jrd.11-132M
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation of ovarian compo- nents essential for growth and development of mammalian oocytes in vitro. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hirao Y
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 58巻 ページ: 167-174
  • 査読あり
• [雑誌論文] 卵母細胞の発育・成熟と減数分裂. (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮野 隆
  • 雑誌名: Journal of Mammalian Ova Research, 日本哺乳動物卵子学会第4回生殖補助医療胚培養士セミナー要旨集 ページ: 8-12
• [雑誌論文] Foxo3 negatively regulates the activation of mouse primordial oocytes. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kashiwagi Y, Moniruzzaman M, Miyano T.
  • 雑誌名: Reproductive Medicine and Biology 巻: 11巻 ページ: 193-199
  • DOI: DOI:10.1007/s12522-012-0128-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oocyte growth in vitro: potential model for studies of oocyte-granulosa cell interactions. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hirao Y
  • 雑誌名: Reproductive Medicine and Biology 巻: 11巻 ページ: 1-9
  • DOI: DOI:10.1007/s12522-011-0096-3
  • 査読あり
• [雑誌論文] 卵母細胞の発育制御機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮野 隆, 平尾雄二
  • 雑誌名: Hormone Frontier in Gynecology 巻: 18巻 ページ: 365-370
• [雑誌論文] Conditions affecting growth and developmental competence of mammalian oocytes in vitro. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirao Y.
  • 雑誌名: Animal Science Journal 巻: 82巻 ページ: 187-197
  • DOI: DOI:10.1111/j.1740-0929.2010.00870.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] FOXO3 knockdown accelerates development of bovine primordial follicles. (2011)
  • 著者名/発表者名: Bao RM, Hayakawa K, Moniruzzaman M, Taketsuru H, Miyano T.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 57巻 ページ: 465-480
  • DOI: DOI:10.1262/jrd.11-013H
  • 査読あり
• [雑誌論文] A combination of FSH and dibutyryl cyclic AMP promote growth and acquisition of meiotic competence of oocytes from early porcine antral follicles. (2011)
  • 著者名/発表者名: Cayo-Colca IS, Yamagami Y, Phan TC, Miyano T.
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: 75巻 ページ: 1602- 1612
  • DOI: DOI:10.1016/j.theriogenology.2010.12.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of H89 on the meiotic resumption of pig oocytes. (2011)
  • 著者名/発表者名: Cayo-Colca IS, Harayama H, Miyano T
  • 雑誌名: Reproductive Medicine and Biology 巻: 10巻 ページ: 89-96
  • DOI: DOI:10.1007/s12522-010-0073-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of KIT ligand on the viability of porcine primordial follicles in vitro. (2011)
  • 著者名/発表者名: Magamage MPS, Moniruzzaman M, Miyano T.
  • 雑誌名: Journal of Mammalian Ova Research 巻: 28巻 ページ: 61-67
  • DOI: DOI:10.1274/jmor.28.61
  • 査読あり
• [雑誌論文] p27^Kip1 negatively regulates the activation of murine primordial oocytes. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirashima Y, Moniruzzaman M, Miyano T.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 57巻 ページ: 217-222
  • DOI: DOI:10.1262/jrd.10-119H
  • 査読あり
• [雑誌論文] Testosterone induces activation of porcine primordial follicles in vitro. (2011)
  • 著者名/発表者名: Magamage MPS, Zengyo M, Moniruzzaman M, Miyano T.
  • 雑誌名: Reproductive Medicine and Biology 巻: 10巻 ページ: 21-30
  • DOI: DOI:10.1007/s12522-010-0068-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bovine oocytes in secondary follicles grow in medium containing bovine plasma after vitrification. (2011)
  • 著者名/発表者名: Taketsuru H, Takajo A, Bao RM, Hamawaki A, Yoshikawa M, Miyano T
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 57巻 ページ: 99-106
  • DOI: DOI:10.1262/jrd.10-047H
  • 査読あり
• [雑誌論文] Growth of primordial oocytes in neonatal and adult mammals. (2010)
  • 著者名/発表者名: Moniruzzaman M, Miyano T
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Development 巻: 56巻 ページ: 559-566
  • DOI: DOI:10.1262/jrd.10-071H
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of vitrified bovine primordial follicles in xenografts. (2010)
  • 著者名/発表者名: Bao RM, Yamasaka E, Moniruzzaman M, Hamawaki A, Yoshikawa M, Miyano T.
  • 雑誌名: Theriogenology 巻: 74巻 ページ: 817-827
  • DOI: DOI:10.1016/j.theriogenology.2010.04.006
  • 査読あり
• [学会発表] 卵母細胞の発育制御機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 宮野 隆
  • 学会等名: 日本生殖再生医学会第8回学術集会
  • 発表場所: シェーンバッハ・サボー(東京)
  • 年月日: 2013-03-10
• [学会発表] Effect of polyvinylpyrrolidone supplementation in culture medium on the growth of mouse oocytes. (2013)
  • 著者名/発表者名: Mizumachi S, Sasaki K, Matsubara K, Hirao Y.
  • 学会等名: 39th Annual Conference of the International Embryo Transfer Society (IETS)
  • 発表場所: Hannover Congress Centrum(ハノーバー, ドイツ)
  • 年月日: 2013-01-21
• [学会発表] Culture systems for growing oocytes (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyano T, Hirao Y.
  • 学会等名: The 9th Annual Conference of the Asian Reproductive Biotechnology Society
  • 発表場所: EDSA Shangri-La Hotel(マニラ, フィリピン)
  • 年月日: 20121023-28
• [学会発表] ウシ卵母細胞の体外での発育と成熟能力の獲得に及ぼすエストラジオール 17β およびアンドロステンジオンの影響 (2012)
  • 著者名/発表者名: 牧田美穂, 平尾雄二, 宮野 隆.
  • 学会等名: 第105回日本繁殖生物学会大会
  • 発表場所: 筑波大学(つくば市)
  • 年月日: 20120905-08
• [学会発表] 卵母細胞の発育・成熟と減数分裂. (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮野 隆
  • 学会等名: 日本哺乳動物卵子学会第4回生殖補助医療胚培養士セミナー
  • 発表場所: JA 共済ビル(東京)
  • 年月日: 2012-09-23
• [学会発表] 未熟卵,卵胞の体外培養 (2012)
  • 著者名/発表者名: 平尾雄二
  • 学会等名: 第30回日本受精着床学会学術講演会
  • 発表場所: リーガロイヤルホテル大阪 (大阪市)
  • 年月日: 2012-08-30
• [学会発表] ウシ発育途上卵母細胞の体外発育からクローン牛の作成まで (2012)
  • 著者名/発表者名: 平尾雄二, 成瀬健司, 金田正弘, Somfai T, 伊賀浩輔, 志水 学, 赤木悟史, 永井 卓, 竹之内直樹
  • 学会等名: 第53回日本哺乳動物卵子学会
  • 発表場所: 千里ライフサイエンスセンター(豊中市)
  • 年月日: 2012-05-26
• [学会発表] Nuclei and nucleoli in pig oocytes. (2011)
  • 著者名/発表者名: Miyano T, Ogushi S, Kyogoku H, Fulka JJr.
  • 学会等名: The 8th Annual Meeting of Asian Reproductive Biotechnology Society
  • 発表場所: Lijiang Waterfall Hotel(桂林, 中国)
  • 年月日: 2011-10-26
• [学会発表] Production of a cloned calf using recipient cytoplasm derived from oocytes grown in vitro. (2011)
  • 著者名/発表者名: 平尾雄二, 成瀬健司, 金田正弘, Somfai T, 伊賀浩輔, 志水 学, 赤木悟史, 永井 卓, 竹之内直樹.
  • 学会等名: The Second World Congress on Reproductive Biology
  • 発表場所: Cairns Convenion Center(ケアンズ, オーストラリア)
  • 年月日: 2011-10-10
• [学会発表] Isolation of ovarian components essential for oocyte growth in vitro. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hirao Y.
  • 学会等名: 日本繁殖生物学会第104回大会,日本・ポーランド二国間交流事業共同セミナー
  • 発表場所: いわて県民情報交流センター・アイーナ(盛岡市)
  • 年月日: 2011-09-14
• [学会発表] ガラス化保存後に体外発育させたウシ卵母細胞の成熟能力 (2011)
  • 著者名/発表者名: 平尾雄二, 成瀬健司, 伊賀浩輔, 竹之内直樹
  • 学会等名: 第52回日本哺乳動物卵子学会
  • 発表場所: 国際医療福祉大学(大田原市)
  • 年月日: 2011-05-21
• [学会発表] Inactivation of primordial oocytes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyano T, Moniruzzaman M.
  • 学会等名: The 7th Annual Conference of Asian Reproductive Bio- technology Society
  • 発表場所: Equatorial Hotel(クアラルンプール, マレーシア)
  • 年月日: 20101108-12
• [学会発表] Activation and inactivation of primordial oocytes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Miyano T, Moniruzzaman M.
  • 学会等名: Czech- Japan Joint Symposium for Animal Reproduction
  • 発表場所: Chateau Liblice(チェコ)
  • 年月日: 20100920-21
• [学会発表] Knockdown of p27^Kip1 induces the growth of oocytes in mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Moniruzzaman M, Hirashima Y, Miyano T.
  • 学会等名: SRF Conference 2010
  • 発表場所: University of Nottingham(ノッティンガム, UK)
  • 年月日: 20100711-13
• [学会発表] ウシ発育途上卵母細胞による in vitro での顆粒膜細胞の増殖促進と黄体化抑制. (2010)
  • 著者名/発表者名: 平尾雄二, 伊賀浩輔, 成瀬健司, 竹之内直樹.
  • 学会等名: 第103回日本繁殖生物学会大会
  • 発表場所: 北里大学(十和田市)
  • 年月日: 2010-09-02
• [図書] Chapter 14: Synchronization of in vitro maturation in porcine oocytes. In "Methods in Molecular Biology" (Banfalvi G, ed.) (2011)
  • 著者名/発表者名: Somfai T, 平尾雄二
  • 総ページ数: 211-225, 295
  • 出版者: Humana Press (New York, USA)
• [図書] 卵子(卵胞)形成と雌の性周期, 「新動物生殖学」, 佐藤英明 編 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮野 隆.
  • 総ページ数: 84-94, 203
  • 出版者: 朝倉書店(東京)
• [図書] III-1 卵子の形成・成熟および排卵の機構(動物), 「生命の誕生に向けて〈第二版〉」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮野 隆
  • 総ページ数: 35-41, 303
  • 出版者: 近代出版(東京)
• [図書] III-3 未成熟卵子の体外成熟法(動物), 「生命の誕生に向けて〈第二版〉」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 平尾雄二
  • 総ページ数: 47-50, 303
  • 出版者: 近代出版(東京)