血管増殖関連分子を利用した血管損傷・血管炎の定量的測定法開発の基盤的研究

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22390113
• 研究機関: 旭川医科大学
• 研究代表者: 若宮 伸隆 旭川医科大学, 医学部, 教授 (20210867)
• 研究分担者: 松下 操 東海大学, 工学部, 教授 (00165812) ; 吉田 逸朗 旭川医科大学, 医学部, 准教授 (20041816) ; 森 健一郎 旭川医科大学, 医学部, 助教 (70610236) ; 鈴木 定彦 北海道大学, 学内共同利用施設等, 教授 (90206540) ; 大谷 克城 旭川医科大学, 医学部, 講師 (90396367) ; 松田 泰幸 旭川医科大学, 医学部, その他 (10532252)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2013-03-31
• キーワード: コレクチン / スカベンジャー受容体 / レクチン / 自然免疫 / 補体 / 形態形成

研究概要

申請者らの発見した新規コレクチン分子CL-P1、CL-K1は、直近の研究により両分子がげっ歯類やヒトで血管内皮細胞と血管平滑筋細胞に存在する事、さらにゼブラフィッシュに血管領域に存在し遺伝子knockdown実験から血管形成に関与する事から、本両遺伝子が血管新生や血管構築に深く関与する可能性を推測している。血管新生・増殖・損傷に関連して分泌するコレクチン分子や血管内皮細胞増殖因子群に対する抗体を利用して、高感度で且つ、一括して同時測定できるような、血管損傷測定システム開発を目論んで本研究を開始した。
平成24年度において、作成できたCL-K1のKOマウスについての表現型の解析を進展させできた。つまり、CL-K1のKOマウスは、表現型では低体重であり、生育不全を認めた。つぎに、マウスにおけるCL-K1の発現解析のための、マウスCL-K1発現系の作成と、抗体作成を行った。一方、ヒトCL-K1の抗体作成が成功し、プロタイプであるが高感度測定システムを開発し、論文発表した。一方、CL-P1KOマウスでは胎生致死の再確認を行い、胎生期のいつ致死に至る研究が進んでいる。さらに、CL-P1TGマウスの作成が終了し、TG発現による発現を組織染色とreal time PCRにより、もっとも発現の高い系統を選択し、KOマウスとTGマウスの交配を行い、胎生致死の改善ができるかどうかの解析を行っている。諸外国（アメリカMGH高橋教授、フランスツールス大学 Olivier教授）との共同研究が本格的に進展し、CL-K1のヒト測定の解析をアメリカ、フランスにて行っている。国内においては、東海大学松下教授、福島県立大学遠藤准教授の間の共同研究で、ヒト、マウスCL-K1の発現系の樹立を行い、生物学的解析を進めた。

現在までの達成度 (区分)

理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] 新規コレクチンは生体防御と形態形成に関与する二重機能性分子である (2013)
  • 著者名/発表者名: 大谷克城、若宮伸隆
  • 雑誌名: 生化学 巻: 85(1) ページ: 38-42
  • URL: http://www.jbsoc.or.jp
• [雑誌論文] Differential cell-protective function of two resveratrol (trans-3,5,4'-trihydroxystilbene) glucosides against oxidative stress. (2013)
  • 著者名/発表者名: Hosoda R, Kuno A, Hori Y. S, Ohtani K, Wakamiya N, Oohiro A, Hamada H and Horio Y.
  • 雑誌名: J Pharmacol Exp Ther. 巻: 344(1) ページ: 124-132
  • DOI: 10.1124/jpet.112.198937.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Soluble Host-Defense Lectins (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsushita M, Kilpatrick D. C., Lee B. L, and Wakamiya N.
  • 雑誌名: Journal of Biomedicine and Biotechnology ページ: 2pages
  • DOI: DOI:10.1155/2012/275970
• [雑誌論文] Biological functions of the novel collectins CL-L1, CL-K1, and CL-P1, (2012)
  • 著者名/発表者名: Ohtani, K., Suzuki, Y., Wakamiya, N.
  • 雑誌名: J Biomedicine and Biotechnology 巻: 2012 ページ: 493945, 8pages
  • DOI: 10.1155/2012/493945
  • 査読あり
• [雑誌論文] Guideline for Hereditary Angioedema (HAE) 2010 by the Japanese Association for Complement Research - Secondary Publication (2012)
  • 著者名/発表者名: Horiuchi T, Ohi H, Ohsawa I, Fujita T, Matsushita M, Okada N, Seya T, Yamamoto T, Endo Y, Hatanaka M, Wakamiya N, et al.
  • 雑誌名: Allergol Int. 巻: 61(4) ページ: 559-562.
  • DOI: 10.2332/allergolint.12-RAI-0471.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 補体系の役割と臨床医学でのトピックス (2012)
  • 著者名/発表者名: 若宮伸隆
  • 雑誌名: 臨床病理 巻: 60(8) ページ: 779-785
• [学会発表] The biological functions and tissue expressions in Collectin Kidney 1 (CL-K1). (2012)
  • 著者名/発表者名: Wakamiya, N., Ohtani, K. Suzuki, Y.
  • 学会等名: International Complement Workshop.
  • 発表場所: Chania, Crete (Greece)
  • 年月日: 20121010-20121015
• [学会発表] The biological functions and blood concentration of CL-K1. (2012)
  • 著者名/発表者名: Wakamiya, N.; Ohtani, K.; Yoshizaki, T.; Mori, K.; Matsuda, Y.; Yoshida, I.; Suzuki, Y.:
  • 学会等名: International Carbohydrate Symposium.
  • 発表場所: Madrid (Spain), 2012. 7.22-27.
  • 年月日: 20120722-20120727
• [学会発表] The Biological Functions of the Novel Collectins CL-L1, CL-K1, and CL-P1. (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Ohtani, K. Mori, Y. Matsuda, I. Yoshida, Y. Suzuki, N. Wakamiya
  • 学会等名: 12th Congress of the International Society of Developmental and Comparative Immunology.
  • 発表場所: Fukuoka (Japan),
  • 年月日: 20120709-20120713
• [学会発表] The biological functions and blood concentration of CL-K1. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nobutaka Wakamiya, Katsuki Ohtani, Takayuki Yoshizaki, Ken-ichiro Mori, Yasuhiko Suzuki
  • 学会等名: 10th Jenner Glycobiology and Medicine symposium.
  • 発表場所: Den Haag (Netherland),
  • 年月日: 20120401-20120403
• [備考] 旭川医科大学学術成果リポジトリ
  • URL: http://amcor.asahikawa-med.ac.jp/
• [備考] 旭川医科大学医学部微生物学講座
  • URL: http://www.asahikawa-med.ac.jp/dept/mc/microbio/microbiology.html