新規がん幹細胞モデルマウスの作製とMLL関連白血病発生の分子基盤

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22390206
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 野阪 哲哉 三重大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (30218309)
• 研究分担者: 北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 教授 (20282527)
• キーワード: MLL / 白血病幹細胞 / がん幹細胞 / 造血幹細胞 / 白血病モデルマウス

研究概要

我々はCre-loxPシステムを使ったMLL-ENL誘導発現型トランスジェニック(TG)マウスを作製し、MLLキメラ遺伝子による白血病発症の分子機構を解析した。TGマウスの骨髄細胞からCD34^-KSL(造血幹)細胞とCD34^+KSL(造血前駆)細胞を単離し、Cre発現レトロウイルスを感染させて、それらの細胞集団にMLL-ENLを誘導発現させ、colony replating assayを行ったところ、MLL-ENLは造血幹細胞のみをtransformした。cDNA microarray解析にて、造血幹細胞特異的に発現しているいくつかの遺伝子が同定され、そのうちの一つ、遺伝子Aに関してさらに解析した。遺伝子AはMLL-ENL発現によってその発現が増加し、shRNAで遺伝子Aの発現をノックダウンすることによって、MLL-ENLが造血幹細胞をトランスフォームする活性が低下した。さらに、MLL-ENL-ER発現マウス骨髄細胞株から4-OHTを除去すると、遺伝子Aの発現が低下した。以上の結果は、MLL-ENLによる造血幹細胞のtransformationにおいて、遺伝子Aの発現が重要な役割を果たしていることを示唆した。上記結果は、従来のレトロウイルスによる強発現実験により報告されてきた、MLLキメラ遺伝子は造血幹細胞及び造血前駆細胞の分化を阻害し、自己複製活性を賦与することによって、白血病を発症させるという概念と異なり、正常造血幹細胞の不死化/異常増殖を促すことによってがん化する、という可能性を示唆する。
MLLキメラの標的遺伝子として、Hox遺伝子群やEvi-1が明らかにされているが、我々が新たに同定した遺伝子Aが、Hox、Evi-1を含めて、どのような分子機構により、造血幹細胞を特異的にがん化するのか、それを明らかにしていくことが、MLL関連白血病発症機構の解明の鍵となるであろう。

研究成果

• [雑誌論文] Human parainfluenza virus type 2 L protein regions required for interaction with other viral proteins and mRNA capping. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishio M, Tsurudome M, Garcin D, Komada H, Ito M, Le Mercier P, Nosaka T, Kolakofsky D.
  • 雑誌名: J Virol 巻: 85 ページ: 725-732
  • DOI: doi: 10.1128/JVI.01226-10.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of domains on the fusion (F) protein trimer that influence the hemagglutinin-neuraminidase specificity of the F protein in mediating cell-cell fusion. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tsurudome M, Ito M, Nishio M, Nakahashi M, Kawano M, Komada H, Nosaka T, Ito Y.
  • 雑誌名: J Virol 巻: (印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] MLL融合遺伝子による白血病発症機構 (2010)
  • 著者名/発表者名: 野阪哲哉、小埜良一
  • 雑誌名: 血液・腫瘍科 巻: 61(2) ページ: 217-223
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of ADAMTS4 in Ewing' s sarcoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Minobe K, Ono R, Matsumine A, Shibata-Minoshima F, Izawa K, Oki T, Kitaura J, Iino T, Takita J, Iwamoto S, Hori H, Komada Y, Uchida A, Hayashi Y, Kitamura T, Nosaka T.
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 37 ページ: 569-581
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cv2, functioning as a pro-BMP factor via twisted gastrulation, is required for early development of nephron precursors. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ikeya M, Fukushima K, Kawada M, Onishi S, Furuta Y, Yonemura S, Kitamura T, Nosaka T, Sasai Y.
  • 雑誌名: Dev Biol 巻: 337 ページ: 405-414
  • 査読あり
• [学会発表] Differential role of myeloid transcription factors, C/EBPα and PU.1 in leukemogenesis by MLL-fusion oncogenes (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukuchi Y, Kuroda K, Sadahira K, Ono R, Tenen DG, Kitamura T, Nosaka T, Okamaoto S, Nakajima H.
  • 学会等名: 第52回アメリカ血液学会
  • 発表場所: Orlando, FL, USA
  • 年月日: 2010-12-04
• [学会発表] ヒトパラインフルエンザ2型ウイルス(hPIV2)L蛋白の転写能に必須であるアミノ酸の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 西尾真智子、鶴留雅人、野阪哲哉
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-11-08
• [学会発表] パラインフルエンザウイルスの膜融合誘導における受容体結合蛋白と膜融合蛋白の相互作用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 鶴留雅人、西尾真智子、伊藤守弘、河野光雄、野阪哲哉、駒田洋、伊藤康彦
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-11-08
• [学会発表] Ikaros isoform 6 enhances proliferative effect by BCR-ABL1 in human CD34+ hematopoietic cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Suzuki K, Ono R, Ohishi K, Kataoka I, Masuya M, HamadaH, Kitamura T, Katayama N, Nosaka T
  • 学会等名: 第72回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2010-09-26
• [学会発表] Differential role of C/EBPα and PU.1 in leukemogenesis by MLL-fusion oncogenes (2010)
  • 著者名/発表者名: Fukuchi Y, Kuroda K, Sadahira K, Ono R, Ikeda Y, Kitamura T, Nosaka T, Okamaoto S, Nakajima H.
  • 学会等名: 第72回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2010-09-24
• [学会発表] Analysis of novel molecular mechanism in transformation by MLL-ENL targeting long-term hematopoietic stem cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ono R, Masuya M, Nakajima H, Enomoto Y, Miyata E, Kamisako T, Ito M, Suzuki K, Katayama N, Kitamura T, Nosaka T.
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2010-09-22
• [備考]
  • URL: http://www.medic.mie-u.ac.jp/microbiol/