Exosome中のmicro RNAを標的とした消化器癌の新規診断・治療法の開発

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22390247
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 馬場 秀夫 熊本大学, 大学院・生命科学研究部, 教授 (20240905)
• 研究分担者: 蒲原 英伸 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (90398222) ; 渡邊 雅之 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (80254639) ; 林 尚子 熊本大学, 医学部附属病院, 講師 (20452899)
• キーワード: microRNA / Exosome / Cancer / 分子生物学 / 実験外科学

研究概要

これまで、我々は消化器癌に関連したmicroRNA発現を主に手術によって摘出された食道癌組織を用いて検証し、miR-21が食道癌の悪性化に関与することを明らかにした(CCR,2009)。ここ数年、血清や尿などの体液中からもmicroRNAの発現が報告されてきたが、その意義については不明である。我々の研究の目的は体液中のmicroRNAの意義を明らかにし、診断や治療などにmicroRNAが応用できるかどうかを検証することである。食道癌患者の化学療法の感受性のbiomarkerを検証するため、患者血清からmirVana(microRNA精製キット)にてmicroRNAを精製した。化学療法の感受性とmiR-21が負に相関していることが分かった。さらに、食道癌患者の手術前の血清中におけるmicroRNAを各種精製キットを利用し、血清全体やexosome(CD9,CD63発現にて確認済)のfractionにおけるmiR-21,miR-16の発現を主体に解析を行い、miR-21は主にexoxome中に存在していることが分かった。手術侵襲が少ない胆石やヘルニアの症例を対象として食道癌患者血清中におけるmiR-21発現を検証した所、食道癌においてmiR-21が有意に血清中に増加していた。miR-21は進行度(stage)などと相関傾向を示しているようなので、症例数を増やし検証していく。さらに、血清のexosome中のmicroRNAの網羅的発現解析のため、microarrayを行っている(sample調整中)。また、exosomeとmicroRNAのtumor microenvironmentにおける意義を明らかにするため、in-vitroにおいて食道癌細胞や間質系細胞(線維芽細胞など)からのexosomeを分離し添加実験を施行している。

研究成果

• [雑誌論文] Induction chemotherapy with docetaxel/cisplatin/5-fluorouracil for patients with node-positive esophageal cancer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Watanabe M, Nagai Y, Kinoshita K, Saito S, Kurashige J, Karashima R, Hirashima K, Sato N, Imamura Y, Hiyoshi Y, Baba Y, Iwagami S, Miyamoto Y, Iwatsuki M, Hayashi N, Baba H
  • 雑誌名: Digestion 巻: 83 ページ: 146-152
  • 査読あり
• [雑誌論文] Irinotecan plus S-1 (IRIS) versus fluorouracil and folinic acid plus irinotecan (FOLFIRI) as second-line chemotherapy for metastatic colorectal cancer : a randomised phase 2/3 non-inferiority study (FIRIS study). (2010)
  • 著者名/発表者名: Muro K, Boku N, Shimada Y, Tsuji A, Sameshima S, Baba H, Satoh T, Denda T, Ina K, Nishina T, Yamaguchi K, Takiguchi H, Esaki T, Tokunaga S, Kuwano H, Komatsu Y, Watanabe M, Hyoso I, Morita S, Sugihara K
  • 雑誌名: Lancet Oncol 巻: 11 ページ: 853-860
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylated mTOR expression is associated with poor prognosis for patients with esophageal squamous cell carcinoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirashima K, Baba Y, Watanabe M, Karashima R, Sato N, Imamura Y, Hiyoshi Y, Nagai Y, Hayashi N, Iyama K, Baba H
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 17 ページ: 2486-2493
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adenoviral oncolytic suicide gene therapy for a peritoneal dissemination model of gastric cancer in mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Imamura Y, Ishikawa S, Sato N, Karashima R, Hiyoshi Y, Nagai Y, Koga Y, Hayashi N, Watanabe M, Yamada G Baba H
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 巻: 17 ページ: 643-652
  • 査読あり
• [雑誌論文] Extensive lymphatic spread of cancer cells in patients with thoracic esophageal squamous cell carcinoma: Detection of CEA-mRNA in the 3-field lymph nodes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Imamura Y, Hayashi N, Sato N, Kinoshita K, Kurashige J, Saito S, Hirashima K, Karashima R, Hiyoshi Y, Nagai Y, Watanabe M, Baba H
  • 雑誌名: J Surg Oncol 巻: 4 ページ: 509-515
  • 査読あり
• [学会発表] Micrro RNA-101 promotes apotosis and suppresses proliferation in esophageal squamous cell carcinoma by repressing the polycomb group orpte in EZH2 (2010)
  • 著者名/発表者名: Kurashige J, Hiyoshi Y, Kamohara H, Iwatsuki M, Kinoshita K, Saito S, Karashima R, Hirashima K, Hayashi N, Watanabe M, Baba H
  • 学会等名: 7th International symposium on cancer research and therapy (ISCRT)
  • 発表場所: 東京会館
  • 年月日: 20101126-20101127
• [学会発表] microRNAによる食道扁平上皮癌抗癌剤効果予測 (2010)
  • 著者名/発表者名: 蔵重淳二、渡邊雅之、岩槻政晃、木下浩一、齋藤誠也、日吉幸晴、蒲原英伸、林尚子、馬場秀夫
  • 学会等名: 第64回日本食道学会学術集会
  • 発表場所: 石橋美術館
  • 年月日: 20100831-20100901
• [学会発表] MicroRNA-21 and -26a are novel markers to predict the sensitivity to chemotherapy in esophageal squamous cell carcinoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kurashige J, Iwatsuki M, Hiyoshi Y, Kamohara H, Kinoshita K, Saito S, Sato N, Karashima R, Hirashima K, Watanabe M, Baba H
  • 学会等名: AACR
  • 発表場所: Walter E Washington Convention Center, USA
  • 年月日: 20100417-20100419
• [学会発表] Micro RNA-101 promotes apoptosis and suppresses proliferation in esophageal squamous cell carcinoma by repressing the polycomb group protein. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiyoshi Y, Kamohara H, Kurashige J, Kinoshita K, Hayashi N, Watanabe M, Baba H.
  • 学会等名: AACR
  • 発表場所: Walter E Washington Convention Center, USA
  • 年月日: 20100417-20100419
• [学会発表] 腫瘍マーカーとしてのmicroRNAの可能性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 蔵重淳二、渡邊雅之、岩槻政晃、齋藤誠哉、木下浩一、佐藤伸隆、平島浩太郎、辛島龍一、今村裕、日吉幸晴、長井洋平、尾崎宣之、宮本裕士、林尚子、馬場秀夫
  • 学会等名: JDDW2010第8回日本消化器外科学会大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2010-10-15
• [学会発表] 胃癌転移を制御する骨髄中新規microRNA、遺伝子の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 岩槻政晃、三森功士、渡邊雅之、深川剛生、森 正樹、馬場秀夫
  • 学会等名: JDDW2010第9回日本消化器外科学会大会肝臓学会・消化器病学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2010-10-15
• [学会発表] 食道癌におけるmicroRNA発現パターンと予後との相関 (2010)
  • 著者名/発表者名: 木下浩一、蒲原英伸、岩槻政晃、藏重淳二、斎藤誠哉、長井洋平、池田貯、林尚子、渡邊雅之、馬場秀夫
  • 学会等名: 第65回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: 下関グランドホテル
  • 年月日: 2010-07-14
• [学会発表] microRNAによる食道癌抗癌剤効果予測の可能性 (2010)
  • 著者名/発表者名: 蔵重淳二、渡邊雅之、木下浩一、齋藤誠也、日吉幸晴、岩槻政晃、蒲原英伸、池田貯、林尚子、馬場秀夫
  • 学会等名: 第65回日本消化器外科学会総会
  • 発表場所: 下関グランドホテル
  • 年月日: 2010-07-14