研究課題
本研究では、着床前期胚発生における胚性ゲノムの活性化(ZGA)や分化全能性の獲得などに係る分子機構の解明を目指した。マウス着床前期胚における遺伝子発現プロファイルデータより着床前期ステージ特異的な発現がin silicoに予想された新規遺伝子を抽出した。今年度は、Kruppel-associated Boxを持つC2H2-zinc finger新規遺伝子(以下、Kzpi)の発現解析および機能解明を目的とした。まず、全長cDNA配列の解読、RT-PCRおよび抗KZPI抗体による発現解析を行った。マウスサンプルを用いた発現解析から、Kzpiは着床前期の2細胞期から胚盤胞期の胚と未分化細胞に発現することが明らかとなり、これはin silico解析の結果と一致していた。また、α-アマニチン添加実験から、Kzpiは受精後に構築された胚性ゲノムより新たに転写される胚性遺伝子であることが明らかになった。Kzpiの全長塩基配列を決定しドメイン解析を行ったところ、Kzpiは転写制御因子であると考えられ、免疫組織化学染色においてもKZPIの核への局在がみられた。ノックアウトマウス(KO)のin vitroにおける着床前期胚発生は正常であったが、平均産仔数およびヘテロ接合体からの出生数は、いずれも野生型と比較してKOで有意に減少していた。今後は、産仔数の減少の背景にある分子機構を明らかにするとともに、長期継代観察を行う予定である。
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Reprod BioMed Online
巻: 22(2) ページ: 103-105
Human Molecular Genetics
巻: 19 ページ: 480-493
Curr Med Chem
巻: 17 ページ: 3245-52
