| 研究分担者 |
畠山 大二郎 岐阜大学, 医学系研究科, 助教 (60377653)
牧田 浩樹 岐阜大学, 医学部・附属病院, 講師 (50345790)
加藤 恵三 岐阜大学, 医学部附属病院, 講師 (40397336)
長瀬 朋子 岐阜大学, 生命科学総合研究支援センター, 助教 (20397326)
川口 知子 岐阜大学, 医学部附属病院, 医員 (30509815)
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| 研究概要 |
本研究では、我々が保有する豊富なヒト歯髄幹細胞(ヒト歯髄バンク)を用いて、「細胞のステムネス性維持における低酸素の有用性と細胞のステムネス性がiPS細胞誘導効率に関与するか否か」を明らかとし、細胞初期化における基本的な知見を得ることを目指す。また、iPS細胞では、以後の「がん化」の問題が大きな課題となっており、「安全なiPS細胞」の樹立方法を探ることを目的とする。
本年度の成果:
1. 低酸素培養(3%O_2)により、増殖性の向上、初代培養の樹立効率の向上(特に高齢者歯髄からの樹立効率の向上)が観察された。また、低酸素培養によりstro-1(未分化マーカー)陽性の細胞の維持と分化能(dentine matrix 1 etcの発現維持)が観察された(lidaetal, Archives of Oral Biology, 2010)。
2. OCT3/4, SOX2, KLF4, LIN28, L-MYC, p53shRNAという6つの因子をエピソーマル・プラスミドを遺伝子導入ベクターとして用い、細胞のゲノムに外来遺伝子挿入のないヒトiPS細胞を効率よく樹立できることを見出した。また同時に、上記の樹立方法で、日本人の約20%への移植適合性を示すHLA3座ホモの歯髄細胞2株から、外来遺伝子の挿入のないiPS細胞を樹立し、ドーパミン神経細胞や網膜色素上皮細胞に分化することを確認した(Nature Method, 2011)。
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