ヒト歯髄由来組織幹細胞のステムネス性維持とｉＰＳ細胞の良質化

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22390383
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 外科系歯学
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 柴田 敏之 岐阜大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50226172)
• 研究分担者: 武田 知子 (川口 知子) 岐阜大学, 医学部附属病院, 医員 (30509815) ; 加藤 恵三 岐阜大学, 医学部附属病院, 講師 (40397336) ; 牧田 浩樹 岐阜大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (50345790) ; 畠山 大二郎 岐阜大学, 医学部附属病院, 講師 (60377653)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2014-03-31
• キーワード: 再生医学 / 歯髄 / iPS細胞

研究概要

本研究では、ヒト歯髄幹細胞を用いて細胞のステムネス性維持における低酸素の有用性とiPS細胞誘導効率の関係解明および安全なiPS細胞の樹立方法を検討した。この成果として
①低酸素培養（3%O2）により、増殖性の向上、初代培養効率の向上が観察され、低酸素培養によりstro-1陽性の細胞の維持と分化能が観察された。さらに、低酸素条件にてiPS細胞誘導効率の向上が示された。②エピソーマル・プラスミドを遺伝子導入ベクターとして用い、細胞のゲノムに外来遺伝子挿入のないヒトiPS細胞を効率よく樹立できることを見出した。③DLX4が細胞初期化に重要な役割を担い発現増強により誘導効率が向上した。

研究成果

• [雑誌論文] Hypoxia-enhanced Derivation of iPSCs from Human Dental Pulp Cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Iida K, Takeda-Kawaguchi T, Hada M, Yuriguchi M, Aoki H, Tamaoki N, Hatakeyama D, Kunisada T, Shibata T, Tezuka K
  • 雑誌名: J Dent Res 巻: 92(10) ページ: 905-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Periostin directly and indirectly promotes tumor lymphangiogenesis of head and neck cancer (2012)
  • 著者名/発表者名: Kudo Y, Iizuka S, Yoshida M, Nguyen PT, Siriwardena SB, Tsunematsu T, Ohbayashi M, Ando T, Hatakeyama D, Shibata T, Koizumi K, Maeda M, Ishimaru N, Ogawa I, Takata T
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(8) ページ: e44488
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0044488
  • 査読あり
• [雑誌論文] A more efficient method to generate integration-free human iPS cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Okita K, Matsumura Y, Sato Y, Okada A, Morizane A, Okamoto S, Hong H, Nakagawa M, Tanabe K, Tezuka K, Shibata T, Kunisada T, Takahashi M, Takahashi J, Saji H, Yamanaka S
  • 雑誌名: Nat Methods 巻: 8(5) ページ: 409-12
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dental pulp cells for induced pluripotent stem cell banking (2010)
  • 著者名/発表者名: Tamaoki N, Takahashi K, Tanaka T, Ichisaka T, Aoki H, Takeda-Kawaguchi T, Iida K, Kunisada T, Shibata T, Yamanaka S, Tezuka K
  • 雑誌名: J Dent Res 巻: 89(8) ページ: 773-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypoxia enhances colony formation and proliferation but inhibits differentiation of human dental pulp cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Iida K, Takeda-Kawaguchi T, Tezuka Y, Kunisada T, Shibata T, Tezuka K
  • 雑誌名: Arch Oral Biol 巻: 55(9) ページ: 648-54
  • 査読あり
• [学会発表] ヒト成人歯髄細胞の幹細胞性とIps細胞誘導 (2014)
  • 著者名/発表者名: 柴田敏之
  • 学会等名: 第13回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2014-03-04
  • 招待講演
• [学会発表] ホメオボックス遺伝子DLX4はヒトiPS細胞の誘導効率を促進する (2014)
  • 著者名/発表者名: 玉置也剛, 青木仁美, 飯田一規, 川口知子, 高橋和利, 石崎明, 國貞隆弘, 柴田敏之, 手塚健一
  • 学会等名: 第13回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2014-03-04
• [学会発表] 低酸素培養がヒト歯髄細胞の樹立効率とiPS細胞誘導に及ぼす影響 (2013)
  • 著者名/発表者名: 飯田一規, 川口知子, 玉置也剛, 杉山健, 畠山大二郎, 牧田浩樹, 柴田敏之
  • 学会等名: 第58回日本口腔外科学会総会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 2013-10-11
• [学会発表] 歯髄細胞間におけるiPS 細胞への誘導効率の比較検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 玉置也剛, 川口知子, 飯田一規, 杉山健, 畠山大二郎, 柴田敏之
  • 学会等名: 第58回日本口腔外科学会総会
  • 発表場所: 福岡市
  • 年月日: 2013-10-11
• [学会発表] 動物由来物質・因子を用いないより安全なヒト歯髄由来細胞の樹立とiPS細胞化の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 川口知子, 飯田一規, 玉置也剛, 畠山大二郎, 柴田敏之
  • 学会等名: 第67回日本口腔科学会総会
  • 発表場所: 宇都宮市
  • 年月日: 2013-05-22
• [学会発表] シンポジウム S001 歯髄・歯周組織・骨・軟骨の再生医療とその展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 柴田敏之
  • 学会等名: 第22回日本歯科医学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 20121109-11
  • 招待講演
• [学会発表] ヒト歯髄細胞の樹立・iPS細胞化に有用な低酸素培養システム (2012)
  • 著者名/発表者名: 飯田一規, 川口知子, 玉置也剛, 畠山大二郎, 牧田浩樹, 柴田敏之
  • 学会等名: 第66回NPO法人日本口腔科学会総会
  • 発表場所: 広島国際会議場(広島市)
  • 年月日: 20120517-18
• [学会発表] ヒト歯髄細胞の樹立・iPS 細胞化に及ぼす低酸素の影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 飯田一規, 川口知子, 玉置也剛, 畠山大二郎, 柴田敏之
  • 学会等名: 第56回日本口腔外科学会総会
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪市)
  • 年月日: 2011-10-21
• [学会発表] ヒト歯髄細胞からゲノムへの遺伝子挿入のないiPS細胞の誘導 (2011)
  • 著者名/発表者名: 玉置也剛, 川口知子, 飯田一規, 畠山大二郎, 柴田敏之
  • 学会等名: 第65回日本口腔科学会総会
  • 発表場所: タワーホール船堀(東京都)
  • 年月日: 2011-04-21
• [学会発表] iPS 細胞バンクのリソースとしてのヒト歯髄細胞の有用性 (2011)
  • 著者名/発表者名: 玉置也剛, 飯田一規, 川口知子, 高橋和利, 國貞隆弘, 柴田敏之, 手塚健一
  • 学会等名: 第10回再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-03-02
• [学会発表] ヒト歯髄細胞のステムネス性維持とIps細胞リソース (2011)
  • 著者名/発表者名: 柴田敏之
  • 学会等名: 第10回再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-03-01
• [学会発表] ヒト歯髄細胞に関する検討・・・ヒト歯髄細胞の発生段階と長期培養におけるステムネス性の変化 (2010)
  • 著者名/発表者名: 飯田一規, 川口知子, 玉置也剛, 畠山大二郎, 柴田敏之
  • 学会等名: 第64回日本口腔科学会総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2010-06-25