| 研究課題/領域番号 |
22500365
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| 研究機関 | 札幌医科大学 |
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研究代表者 |
當瀬 規嗣 札幌医科大学, 医学部, 教授 (80192657)
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| 研究分担者 |
小林 武志 札幌医科大学, 医学部, 助教 (80363688)
前田 佐知子 札幌医科大学, 医学部, 助教 (80343391)
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| キーワード | 心臓 / 発生・分化 / カルシウムチャネル / 活動電位 / 蛍光色素 / 分子生物学 / 興奮収縮連関 / 生理学 |
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| 研究概要 |
本研究は、「心臓はいつどのように動き出すのか?」という根本的な疑問の解明を目的としている。本年度は、心拍動が開始されるラット胎生10.00～10.15日目の心臓原基において、自発的かつ継続的な活動電位発生の引金を引く"キー電流"の責任タンパクの検索を分子生物学的に行った。RT-PCR法およびin-situハイブリダイゼーション法により、興奮の開始時期において心臓の興奮収縮連関の枢軸をなすL型カルシウムチャネルのイオン通路を構成するα1サブユニットのサブタイプに変化を捕まえた。すなわち、α1Cサブユニットは興奮開始直後に発現が増大するのに対し、α1Dサブユニットは興奮開始直前に発現が増大することである。静止膜電位を形成するカリウムチャネルの遺伝子や、他の組織で自動性に関与するとされるIfチャネルなどのタンパク発現については、この時期にほとんど増減しないことが分かった。したがって、"キー電流"の候補はα1Dサブユニットにより形成されるL型カルシウムチャネルのサブタイプであると考えられる。そこで、膜電位感受性蛍光色素を用いた心臓発生領域全体の電気生理学的検討を計画し、これによりα1Dサブユニットと興奮発生との関連を明らかにすることにした。本年度はそのための新たな測定機器の整備・調整を行い、カルシウム蛍光色素との同時測定が可能となった。これにより心拍動開始時の興奮収縮連関の機構を解明できるデータを得られる状態となり、準備が完了した。次年度に本格的な測定、検討を開始する予定である。
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