ヒト疾患モデルウサギの精子バンク構築に向けての関連技術の整備

2012 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22500386
• 研究機関: 佐賀大学
• 研究代表者: 北嶋 修司 佐賀大学, 総合分析実験センター, 准教授 (70284643)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2013-03-31
• キーワード: 凍結保存 / バイオリソース / 疾患モデル / ウサギ / 遺伝子組換え

研究概要

現在使用している凍結保存液には、ニワトリの卵黄が含まれている。卵黄は、家畜の精子凍結の際も凍結保存液にしばしば加えられているが、品質が安定しない、微生物汚染、海外へ輸送する場合には卵自体が検疫対象物となるなどの問題点を有している。そのため、卵黄を含まず、化学的に構成成分が明らかな新規の凍結保存液の開発が必要である。今年度の検討で、我々は凍結保存液に卵黄の代わりに大豆由来のレシチンを加えることで、凍結融解後の精子運動率について同等の成績が得られるという結果を得た。したがって、当初、本年度に予定していた凍結精子での輸送に関する検討を遅らせ、凍結保存液へのレシチンの添加が卵黄の代替となり得るかどうかについてさらに検討を進めた。まず、凍結保存液に添加するレシチンの至適濃度を決定した。現在、レシチンを添加した凍結保存溶液を用いて凍結した精子を用いて人工授精を実施し、妊娠率、産仔数等について評価中である。これまでの成績と比較して差がなければ、今後、レシチンを使用した凍結保存液に変更する。また、新規保存液の開発と平行して、従来の卵黄を含む凍結保存液を用いて、我々が保有する遺伝子改変ウサギ系統について凍結精子による系統保存の実施を進めてきが、本研究期間内に６系統すべてについて凍結精子の保存を実施することができた。我々が保存するこれらのウサギ系統については、ホームページ上にて公表を行っている（http://www.animal.med.saga-u.ac.jp/index.php?id=2）。本研究により、ヒト疾患モデルウサギの精子バンク確立のための基盤技術の整備と実際に凍結精子による系統保存の実施を進める事ができたと考えられる。

現在までの達成度 (区分)

理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Delaying embryo development by storing at 4°C for synchronization to recipients in microinjection technique in rabbits (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishijima, K., Liu, E., Yamaguchi, S., Tanaka, M., Morimoto, M., Watanabe, T., Fan, J. and Kitajima, S.
  • 雑誌名: Lab. Anim 巻: 47 ページ: 53-57
  • DOI: DOI:10.1258/la.2012.012097
  • 査読あり
• [雑誌論文] Human apolipoprotein AII protects against diet-induced atherosclerosis in transgenic rabbits (2013)
  • 著者名/発表者名: Wang, Y., Niimi, M., Nishijima, K., Yu, Y., Koike, T., Kitajima, S., Inoue, T., Waqar, A.B., Liu, E., Kohashi, M., Keyamura, Y., Yoshigawa, T., Zhang, J., Ma, L., Zha, X., Watanabe, T., Asada, A., Y. Chen, E. and Fan, J.
  • 雑誌名: Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol 巻: 33 ページ: 224-231
  • DOI: DOI:10.1161/ATVBAHA.112.300445
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of the primary cooling rate on the motility and fertility of the frozen-thawed rabbit spermatozoa (2012)
  • 著者名/発表者名: Maeda, T., Liu, E., Nishijima, K., Tanaka, M., Yamaguchi, S., Morimoto, M., Watanabe, T., Fan, J. and Kitajima, S.
  • 雑誌名: World Rabbit Sci. 巻: 20 ページ: 65-70
  • DOI: DOI:10.4995/wrs.2012.1080
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endothelial lipase mediates HDL levels in normal and hyperlipidemic rabbits (2012)
  • 著者名/発表者名: Zhang, J., Ying Yu, Y., Nakamura, K., Tomonari Koike, T., Waqar, A. B., Zhang, X., Liu, E., Nishijima, K., Kitajima, S., Shiomi, M., Qi, Z., Yu, J., Graham, M. J., Crooke, R. M., Ishida, T., Hirata, K., Hurt-Camejo, E., Chen, Y. E., Fan, J.
  • 雑誌名: J. Atheros. Thromb 巻: 19(3) ページ: 213-226
  • DOI: DOI:10.5551/jat.11148
  • 査読あり
• [学会発表] Cholesterol-loaded cyclodextrinを添加したウサギ精子の凍結融解後の運動性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中麻衣
  • 学会等名: 九州実験動物研究会
  • 発表場所: 長崎大学（長崎）
  • 年月日: 20121110-20121111
• [学会発表] ウサギバイオリソース整備に向けての試み (2012)
  • 著者名/発表者名: 北嶋修司
  • 学会等名: 公開シンポジウム 「先進医療研究に貢献するウサギ疾患モデルの開発と動脈硬化の病態解明への応用」
  • 発表場所: 山梨大学（山梨）
  • 年月日: 20120811-20120811
  • 招待講演
• [学会発表] Apolipoprotein A-II plays an important role in lipid metabolism (2012)
  • 著者名/発表者名: 小池智也
  • 学会等名: 日中合同ウサギバイオサイエンスフォーラム
  • 発表場所: 宮崎観光ホテル（宮崎）
  • 年月日: 20120804-20120804
• [学会発表] ヒトC-反応性蛋白遺伝子導入ウサギの骨代謝 (2012)
  • 著者名/発表者名: 西島和俊
  • 学会等名: 日中合同ウサギバイオサイエンスフォーラム
  • 発表場所: 宮崎観光ホテル（宮崎）
  • 年月日: 20120804-20120804
• [備考] 佐賀大学総合分析実験センター生物資源開発部門 研究活動の紹介
  • URL: http://www.animal.med.saga-u.ac.jp/index.php?id=2
• [備考] 佐賀大学総合分析実験センター生物資源開発部門 遺伝子改変ウサギ
  • URL: http://www.animal.med.saga-u.ac.jp/index.php?id=13