染色体を単位としたゲノム輸送システムの構築

2013 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22500426
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医用生体工学・生体材料学
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 加藤 基伸 鳥取大学, 医学部, 助教 (00273904)
• 研究分担者: 井上 敏昭 鳥取大学, 医学部, 准教授 (80305573)
• 研究期間 (年度): 2010-04-01 – 2013-03-31
• キーワード: 微小核細胞 / 細胞融合 / 染色体導入 / 麻疹ウイルス / エンベロープタンパク質 / CD46 / 一本鎖抗体 / リターゲティング

研究概要

ミクロセル融合による染色体移入の効率を改善するため、膜融合活性を持つ麻疹ウイルスエンベロープタンパク質の利用を検討した。ポリエチレングリコール（PEG）による従来法と比較して、最大10倍の効率改善が認められた。移入効率は受容細胞におけるエンベロープタンパク質の受容体であるCD46の発現に依存することが明らかとなった。そこでCD46低発現である正常繊維芽細胞への染色体移入を目指して、受容体の指向性改変を試みた。エンベロープタンパク質に対しCD13ないしトランスフェリン受容体に対する一本鎖抗体を付加することにより、PEGでは困難であった正常繊維芽細胞への染色体移入が可能となった。

研究成果

• [雑誌論文] The transfer of human artificial chromosomes via cryopreserved microcells (2013)
  • 著者名/発表者名: Narumi Uno, Katsuhiro Uno, Susi Zatti, Kana Ueda, Masaharu Hiratsuka, Motonobu Katoh, Mitsuo Oshimura
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: Vol.65, No.5 ページ: 803-809
  • DOI: 10.1007/s10616-013-9548-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Exploitation of the interaction of measles virus fusogenic envelope proteins with the surface receptor CD46 on human cells for microcell-mediated chromosome transfer (2010)
  • 著者名/発表者名: Motonobu Katoh, Yasuhiro Kazuki, Kanako Kazuki, Naoyo Kajitani, Masato Takiguchi, Yuji Nakayama, Takafumi Nakamura, Mitsuo Oshimura
  • 雑誌名: BMC Biotechnology 巻: Vol.10 ページ: 37-48
  • DOI: 10.1186/1472-6750-10-37
  • 査読あり
• [学会発表] Chromosome transfer via microcell fusion utilizing retargeted fusogenic envelope protein of Measles Virus (2011)
  • 著者名/発表者名: Motonobu Katoh, Narumi Uno, Kana Ueda, Masaharu Hiratsuka, Yuji Nakayama, Yasuhiro Kazuki, Takafumi Nakamura, Mitsuo Oshimura
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] 麻疹ウイルスエンベロープタンパク質を利用したヒト人工染色体ベクターのin vivo導入へ向けた試み (2011)
  • 著者名/発表者名: 高橋悠, 加藤基伸, 尾崎充彦, 中山祐二, 中村貴史, 井上敏昭, 押村光雄
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] Chromosome transfer via microcell fusion utilizing fusogenic envelope proteins of Measles Virus (2010)
  • 著者名/発表者名: Motonobu Katoh, Yasuhiro Kazuki, Haruka Takahashi, Kanako Kazuki, Naoyo Kajitani, Masato Takiguchi, Yuji Nakayama, Takafumi Nakamura, Toshiaki Inoue, Mitsuo Oshimura
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド
  • 年月日: 2010-12-07