| 研究課題/領域番号 |
22500527
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
井之川 仁 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教 (40285250)
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| キーワード | 傍細胞記録 / 視床下部 / オレキシン / 黒質 / ドーパミン |
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| 研究概要 |
1。視床下部ニューロンから傍細胞記録を行うための動物麻酔条件や電極刺入部位の検討を行った。イソフルラン1.5～1.7%(毎分1リットル)で良好な結果を得た。刺入部位はブレグマを基準に尾側へ3.0-3.2mm外側へ1.3mm深さ8-8.5mmで記録しやすい結果を得た。
2。数ヘルツで自発発火するニューロンや、散発的に発火するニューロンを観察することができた。さらにそれらニューロンにニューロビオチンを電気泳動的に注入し、潅流固定後脳の薄切切片を作成し免疫組織化学的にニューロビオチン陽性細胞を観察することができた。
3。オレキシンニューロンであるかを同定するためにオレキシン抗体による免疫染色はこれからの課題である。
4。ここまでに、傍細胞記録法による観察と電気泳動による神経トレーサー注入がうまくいくことが確認された。また、比較的効率よく目標となるニューロンを記録する脳領域の確認ができたことは、今後の実験を効率良く進める上で重要な観察結果を得られた。
5。オレキシンニューロンに対するドーパミン入力を調べるために黒質緻密部への電気刺激を試みている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の予想より若干オレキシンニューロンとドーパミン入力の関係を明らかにすることに時間がかかっている(In vivo実験のためブラインドで記録するため)が概ね予定とおりである。
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| 今後の研究の推進方策 |
目的とするニューロンの発見と記録、並びにドーパミン入力の有無を確かめるためには実験回数を増加する必要がある。
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