• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2011 年度 実績報告書

遺伝子改変動物や培養細胞を用いたコエンザイムQ10結合蛋白質の生理的意義の解明

研究課題

研究課題/領域番号 22500681
研究機関東京工科大学

研究代表者

山本 順寛  東京工科大学, 応用生物学部, 教授 (60134475)

研究分担者 加柴 美里  東京工科大学, 医療保健学部, 講師 (80338186)
キーワード老化 / 脂質 / 抗酸化物質 / 蛋白質
研究概要

ATP産生に不可欠であり抗酸化物質としても重要であるが,加齢とともに細胞内濃度が減少するコエンザイムQ10(CoQ10)が加齢・老化に伴う機能障害の鍵を握る物質の一つとして注目を集めている.脂溶性であるCoQ10の細胞内外への輸送にはその結合蛋白質が必須であり,代表者らは世界で初めてサポシンBがCoQ10結合蛋白質であることを明らかにした(J.Clin.Biochem.Nutr.(2008)42:167-174).遺伝子工学手法によりCoQ結合蛋白質サポシンBをノックダウンまたは高発現させたマウスや動物細胞を用いて,サポシンBの生理的意義や加齢・老化に対する影響を解明することが本研究の目的である.
1,プロサポシンノックアウトマウスを用いたCoQ10結合蛋白質の生理的意義の解明
サポシンBの前駆体であるプロサポシンのノックアウトマウスを解析した.本年度は,引き続きCoQ10添加食を投与したときの各種臓器におけるCoQ10量の解析を行った.結果,ホモ体においては,CoQ投与食添加後の血漿中および臓器中の外因性CoQ量が有意に低下していることを確認した.
2,プロサポシン遺伝子改変培養細胞を用いたCoQ10結合蛋白質の生理機能の解明
すでに樹立したヒト肝癌由来HepG2細胞のプロサポシン高発現株を用いて,細胞内CoQ10量を解析した.高発現株ではCoQ10量が増加していた.シュークロースグラジエント手法を用いて細胞分画をおこない各オルガネラのCoQ10量を比較したところ,ミトコンドリア分画においてCoQ10量の顕著な増加を認めた.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

交付申請書の研究の目的として(1)プロサポシンノックアウトマウスを用いたCoQ10結合蛋白質の生理的意義の解明と(2)プロサポシン遺伝子改変培養細胞を用いたCoQ10結合蛋白質の生理機能の解明の2点を記載したが,いずれもほぼ計画通りに解析が進捗している.

今後の研究の推進方策

今後の予定として,応募書類調書に記載したごとく,ヒト肝癌由来HepG2に加え,ヒト単球由来THP1等のプロサポシンのノックダウン株あるいはプロサポシンを高発現させた細胞株を作製する.さらに,サポシンBに生理作用があることを明らかにするために,サポシンB部位にミュータントを導入した細胞株の作製を試みる.各オルガネラとサイトゾル分画中のCoQ10含量やCoQ10の酸化還元状態の解析も併せて検討したい.

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (5件)

  • [雑誌論文] Effects of coenzyme Q10 on salivary secretion 669-674 (2011)2011

    • 著者名/発表者名
      Ryo K, Ito A, Takatori R, Tai Y, Arikawa K, Seido T, Yamada T, Shinpo K, Tamaki Y, Fujii K, Yamamoto Y, Saito I
    • 雑誌名

      Clin Biochem

      巻: 44 ページ: 669-674

    • DOI

      10.1016/j.clinbiochem.2011.03.029

    • 査読あり
  • [学会発表] コエンザイムQ結合蛋白質プロサポシン発現量改変株の酸化ストレスに対する感受性2012

    • 著者名/発表者名
      ジョン・チュンユン, 長嶋康平, 大泉美希子, 鈴木優, 森内寛, 加柴美里, 吉村眞一, 山本順寛
    • 学会等名
      日本コエンザイムQ協会第9回研究会
    • 発表場所
      東京(東京工科大学)
    • 年月日
      2012-01-24
  • [学会発表] 母乳中のコエンザイムQ10とその結合タンパク質プロサポシン2012

    • 著者名/発表者名
      宮内優樹, 関学, 宮前多佳子, 藤田秀次郎, 石田史彦, 森内寛, 加柴美里, 横田俊平, 山本順寛
    • 学会等名
      日本コエンザイムQ協会第9回研究会
    • 発表場所
      東京(東京工科大学)
    • 年月日
      2012-01-24
  • [学会発表] ヒト・プロサポシン過剰発現マウスにおけるコエンザイムQとビタミンEの体内動態2012

    • 著者名/発表者名
      関学, 浅利真司, 長尾美好, 山本順寛, 吉村眞一
    • 学会等名
      日本コエンザイムQ協会第9回研究会
    • 発表場所
      東京(東京工科大学)
    • 年月日
      2012-01-24
  • [学会発表] コエンザイムQ10結合タンパク質プロサポシンはビタミンEも結合する2012

    • 著者名/発表者名
      柿澤祐樹, 山崎好裕, 勇内山広樹, 長谷川誠, 森内寛, 山本順寛
    • 学会等名
      日本コエンザイムQ協会第9回研究会
    • 発表場所
      東京(東京工科大学)
    • 年月日
      2012-01-24
  • [学会発表] The role of CoQ10 binding and transfer protein2011

    • 著者名/発表者名
      Yorihiro Yamamoto
    • 学会等名
      5th Society for Free Radical Research (SFRR)-Asia Meeting
    • 発表場所
      Kagoshima(鹿児島市民文化ホール)(招待講演)
    • 年月日
      20110831-20110904

URL: 

公開日: 2013-06-26  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi