| 研究概要 |
本研究では我々が作成したHsp90α null マウス及びconditional Hsp90α KO マウスを用いて、腫瘍免疫に於けるHsp90α の役割、とりわけ樹状細胞によるクロスプレゼンテーション(XP)におけるHsp90α の機能を解析することを目的とした。さらに、エンドゾームに取り込まれた外来性蛋白抗原が細胞質へ出てくる際にHsp90α が必須である事を証明することを目指した。この目的のうち主要な部分は達成されたと考える。まず、Hsp90α null マウス及びconditional Hsp90α KOマウスの作成、樹立は予定通りに進み、同マウスを用いてin vitro, in vivoにおけるXPにおけるHsp90α の必要性を証明する事ができた。即ち、Hsp90α null樹状細胞では可溶性抗原及び細胞関連抗原の両方のXP機能が低下していた。またシトクロームc投与マウスではXPに関係するCD11c+CD8+樹状細胞がアポトーシスにより死滅するが、Hsp90α null マウスにおいては死滅が回避される事を証明した。即ち、投与したシトクロームcがHsp90α nullのCD11c+CD8+樹状細胞においては細胞質へ届かないことを示唆している。さらに貪食された可溶性抗原が細胞質へ移行する過程をImageStream解析及び蛍光顕微鏡解析により明らかにできた。即ち、Hsp90α null樹状細胞においては貪食されてエンドゾーム内に入った抗原が細胞質へ移行しにくい事、またHsp90阻害剤で予め樹状細胞を処理しておくと、細胞質への移行がさらに抑制されることがわかった。生化学的に抗原貪食ファゴゾームを精製し、これにHsp90を添加するだけで抗原がファゴゾームの外に遊離されることが判明した。
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