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2011 年度 実績報告書

核酸とエンドトキシンの分離のためのシクロデキストリン架橋球状粒子の調製と応用

研究課題

研究課題/領域番号 22550200
研究機関熊本大学

研究代表者

坂田 眞砂代  熊本大学, 自然科学研究科, 准教授 (60187391)

キーワードシクロデキストリン / エンドトキシン / DNA分離 / 選択吸着 / LPS吸着剤 / キャビティ / 包摂作用
研究概要

本年度は、シクロデキストリン(CyD)架橋球状粒子のエンドトキシン(リポ多糖:LPS)選択吸着能に及ぼすCyDの空孔径サイズの影響について調査した。
吸着剤の設計としては、空孔径サイズの異なるα-,β-,γ-CyDをリガンドとして、エピクロロヒドリン(EP)を架橋剤として用いた。得られた種々のCyD/EP共重合体のLPS吸着能の比較では、α-CyD<β-CyD<・γ-CyDの順にLPS吸着能が高く、空孔径が0.85nmと最も大きいγ-CyDを用いたCyD/EP共重合体が最も高いLPS吸着能を示した。
仕込みモル比で、γ-CyD/EP=1/4の共重合体は、水溶液中のLPS濃度を10EU/mLから1EU/mL程度に低下させることができ、最もLPS吸着除去能が高かった。γ-CyD/EP=1/2~1/1の合成も試みたが、得られた生成物の水膨潤度が著しく高く、粒径20μm以上の固体高分子が得られなかった。吸着剤の機械的強度から考えると、γ-CyD/EP=1/3~1/4の共重合体が吸着剤として望ましいことがわかった。
さらに、種々の吸着剤のLPS/DNA混合溶液からのLPS選択吸着能を比較したところ、従来のカチオン性粒子は、LPSとDNAの両方に対して高い吸着能を示したのに対して、γ-CyD/EP=1/4粒子はDNAを吸着することなく、LPSのみに選択性を示した。以上の結果から、γ-CyD/EP=1/4粒子は、従来のLPS吸着剤のように静電性でLPSを吸着するのではなく、CyD細孔へ取り込むことによる疎水性でLPSを吸着するため、DNAとの相互作用がほとんどなく、LPS/DNA混合溶液からのLPS選択除去剤として大いに期待できるという結果が得られた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本研究で開発した吸着剤は、市販のLPS吸着剤に比べてLPS吸着除去能がやや劣るが、DNAとの相互作用をほとんど示さないため、DNAを吸着することなく、LPSのみに選択性を示した。この結果は、当初の目的のひとつである「LPS/DNA混合溶液からのLPS選択吸着」を達成できている。

今後の研究の推進方策

吸着剤のLPSに対する吸着定数や吸着容量を増大させる必要が不可欠である。次年度は、吸着剤剤の設計としては、空孔径サイズの最も大きいγ-CyDをリガンドとして用い、エピクロロヒドリン以外の架橋剤を用いて、吸着剤のLPS吸着定数の増大を目標とする。具体的には、疎水性の特性を有する種々のポリウレタンとγ-CyDとの共重合体の調製し、LPS吸着能およびLPS選択性能を評価する。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2011

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Selective removal of endotoxin from a DNA solution by cross-linked cyclodextrin beads2011

    • 著者名/発表者名
      坂田眞砂代、吉村佳奈、坂本逸美、戸所正美、國武雅司
    • 雑誌名

      Analyrical Sciences

      巻: 27 ページ: 213-216

    • DOI

      10.2116/analsci.27.213

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cross-linked cyclodextrin beads for chromatographic removal of endotoxin from DNA solution2011

    • 著者名/発表者名
      坂田眞砂代、上園康史、吉村佳奈、國武雅司
    • 雑誌名

      Proceeding of The 3rd Asian Symposium on Advanced Materials

      ページ: 186

  • [学会発表] Chromatographic removal of endotoxin from DNA solution by cross-linked cyclodextrin beads2011

    • 著者名/発表者名
      上園康史、吉村佳奈、坂田眞砂代、國武雅司
    • 学会等名
      The 12^<TH> Pacific Polymer Conference
    • 発表場所
      The Shilla Hotel, Jeju Island, Korea
    • 年月日
      2011-11-14
  • [学会発表] Removal of endotoxin from DNA solution by cyclodextrin polymer beads2011

    • 著者名/発表者名
      坂田眞砂代、吉村佳奈、上園康史、國武雅司
    • 学会等名
      The 2nd FAPS Polymer Congress
    • 発表場所
      China National Convention Center, Beijing, China
    • 年月日
      2011-05-10

URL: 

公開日: 2013-06-26  

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