研究課題
本研究では、SAP130(SPLICEOSOME ASSOCIATED PROTEIN 130)機能に着目して、植物形態形成の分子メカニズムの解明を目的とした。SAP130は、mRNA代謝に関わるSF3b、転写制御に関わるSTAGAやTFTC、タンパク質分解制御に関わるCRL型E3やCSNなどのタンパク質複合体に同定され、その機能は多岐にわたる。ここでは、SAP130が結合相手に依存して機能『モード』を使い分けるものと考え、各モードでSAP130が担う制御機構とそのターゲット遺伝子群の解明を目指した。今年度の成果を以下に列記する。花粉から全mRNAを抽出して定量的に転写産物量発を解析する系を確立したので、これを用いてSAP130のターゲット候補因子群の解析を進めている。またSAP130とCSN1とを安定して産生するin vitro系を確立し、その結合部位がCSN1のcoiled-coilよりさらにN末端の領域にあることを見出した。これらの知見をもとに、SAP130-CSN1結合部位の詳細な決定を目指し、両タンパク質の結晶構造解析を共同研究で進めている。また、SAP130と結合するCSN1の部分相補変異植物が、不稔形質を示すものがあることが前年度判明したので、その原因を詳細に解析した。まず、CSN1の部分相補変異植物の花粉は生存率、発芽率がともに低いことが判明した。つぎに、この植物では花粉形態形成のmicrospore期からbicellular期への移行期に形態形成異常があることが明らかとなった。これらの花粉における異常は、形態的にも異常が発生する時期的にもSAP130発現抑制植物のそれと一致する。これらの結果からSAP130とCSNとが協調的に制御する共通メカニズムが存在すると考えている。
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Mol Plant
巻: Mar 9. Epub ahead of print ページ: in press
doi: 10.1093/mp/sst045
PLoS ONE
巻: 7 ページ: e43980
doi:10.1371/journal.pone.0043980
