| 研究概要 |
SYP123, SYP132に結合するタンパク質の同定および同定した分子の機能解析
前年度は、SYP123に結合する複数のタンパク質が、GFP-SYP123を発現する植物体からの免疫沈降法および質量解析法によって、既に同定を行った。このなかで、細胞骨格系および小胞輸送に関係する分子を選び出し、更に酵母ツーハイブリットや葉肉細胞のプロトプラストを用いたスプリット・ルシフェラーゼ・コンプリメンテーションアッセイ法(スプリット・ルシフェラーゼ法)によって二分子間相互作用を確認した。その結果、アクチンに相互作用するSH3P1という分子がSYP123に相互作用することが明らかとなった。更に、GFP-SH3P1を発現することができる形質転換シロイヌナズナを作成し、その局在を解析した。その結果、GFP-SH3P1は、SYP123と同じく、根毛の先端に局在しているほか、根端の分裂組織中の分裂中の細胞の細胞板に強く局在することが明らかとなった。
現在、SH3P1のT-DNA挿入遺伝子破壊株をSALK研究所より取得し、当該遺伝子が破壊された場合の表現形の解析を根毛の伸長を中心に行っている。今後、当該分子の過剰発現トランスジェニックシロイヌナズナも作成し、当該分子が大量に存在する場合のgain-of-function解析を行う。
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