| 研究概要 |
DNA組換え修復はヒトでは染色体を安定に維持し発癌や老化を防ぐのに必須の生命現象であり,その基本的な機構は生命で共通である.現在の所,そこに働く蛋白質群が明確に分かっている経路は原核生物のRecF経路のみであり,本研究課題では,組換え修復制御のモデル系としてRecF経路に働く蛋白質群(RecA,RecF,RecO,RecR,SSB,RecX)を取り上げ,それらの単体や複合体としての機能,また,それらの間に存在する相互作用が系全体に与える影響を詳細に解析している.本年度は実際に組換えを進行させるRecAの活性を負に制御することが知られているRecXに注目して研究を行った.これまでに,RecXはRecAフィラメントの伸長末端に結合し,そのフィラメント形成を抑制することによりRecAの活性を阻害していると考えられて来た.しかしながら,今回,研究代表者はRecXとSSBが直接相互作用することを世界で初めて明らかにし,SSB存在下ではRecAに対するRecXの阻害効果が増大することを見出した.さらに,NMR解析によりRecXのSSB結合部位を同定し,その結果を基にRecAには相互作用するがSSBに相互作用しないRecX変異蛋白質を調製した.そして,この変異体がSSB非存在下では野生型と同程度の阻害を示すにも関わらず,SSB存在下では野生型に見られる阻害の増大を示さないことを明らかにした.SSBは単鎖DNA上を移動しながらその二次構造を解消するため,RecAのフィラメント形成を促しその活性を促進することが知られている.今回得られた結果から,SSBにRecXが結合することによりSSBの単鎖DNA上での動きが抑制され,その結果,RecAのフィラメント形成,さらにはその活性が阻害されるという全く新しい阻害メカニズムが明らかになった.
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| 今後の研究の推進方策 |
研究計画とそこから得られる結果は十分満足いくものであることから,本研究課題を進展させる方法に間違いは無いと考えられる.このまま,同手法を他の蛋白質群にも適応していくことにより,さらなる発展が望めるため,現状のまま研究を推進する.
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