ディクチオ型粘菌の細胞分化阻害を用いたアクチン機能変異体のハイスループット分離

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22570163
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物物理学
• 研究機関: 帝京大学
• 研究代表者: 若林 健之 帝京大学, 医療技術学部, 教授 (90011717)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: アクチン / ミオシン / 細胞分化 / 収縮タンパク質 / 機能的変異株 / 細胞性粘菌 / X 線結晶解析 / ATPase

研究概要

アクチンは通常の真核細胞に最も多く含まれ、その重合は、神経細胞樹状突起の形成、がん細胞浸潤や白血球の細胞移動、分化の際の細胞運動に必須である。ディクチオ型粘菌に変異型アクチンを発現させたると野生型アクチンも発現しているのに、細胞分化異常が生じ、アクチンの機能的変異を検出できた。チロシン143の変異により重合能やミオシンのATPase活性化に変化が出た。この変異アクチンに関しては結晶解析を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Electron microscopic evidence for the myosin head lever arm mechanism inhydrated myosin filaments using the gas environmental chambe (2011)
  • 著者名/発表者名: H. Minoda, T. Okabe, Y. Inayoshi, T. Minakata, Y. Miyauchi, M. Tanokura, E. Katayama, T. Wakabayashi, T. Akimoto, *H. Sugi
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 405 ページ: 651-656
  • 査読あり
• [雑誌論文] アクチンのフィラメント構造と重合機構---重合による ATPase 活性化のメカニズム--- (2011)
  • 著者名/発表者名: 若林健之、村上健次
  • 雑誌名: 生物物理 巻: 51(6) ページ: 256-259
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural Basis for Actin Assembly (2010)
  • 著者名/発表者名: K. Murakami, T. Yasunaga, T. Q. P. Noguchi, Y. Gomibuchi, K. X. Ngo, T. Q. P. Uyeda, & T. Wakabayashi
  • 雑誌名: Activation of ATP Hydrolysis, and Delayed Phosphate Release 巻: 143 ページ: 275-287
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dominant negative mutant actins identified in flightless Drosophila can be classified into three classes, including perturbation of the tropomyosin-troponin system (2010)
  • 著者名/発表者名: T. Q. P. Noguchi, Y. Gomibuchi, K. Murakami, H. Ueno, K. Hirose, T. Wakabayashi, & T. Q. P. Uyeda
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 巻: 285 ページ: 4337-4347
  • 査読あり
• [学会発表] Changes of biochemical properties of Dictyostelium actin induced by mutation of tyrosine-143 (2012)
  • 著者名/発表者名: 五味渕由貴、 上田太郎、 若林健之
  • 学会等名: 日本生物物理学会
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 20120912-14
• [学会発表] Changes of biochemical properties of Dictyostelium actin induced by mutation of tyrosine-143 (2012)
  • 著者名/発表者名: T. Wakabayashi and K. Murakami
  • 学会等名: Interaction between the Components of Actin-containing Filaments
  • 発表場所: First Kyushu Annual Meeting of Biophysics Society of Japan
  • 年月日: 20120912-14
• [学会発表] (2011)
  • 著者名/発表者名: 若林健之、村上健次、五味渕由貴、安永卓生、上田太郎、野口太郎
  • 学会等名: 蛋白質科学会年会ワークショップ
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2011-06-07
• [学会発表] How actin assembly triggers activation of ATP hydrolysis (2010)
  • 著者名/発表者名: K. Murakami, T. Yasunaga, T. Q. P. Noguchi, T. Q. P. Uyeda & T . Wakabayashi
  • 学会等名: Symposium on motor functions
  • 発表場所: Alpbach, Austria
  • 年月日: 20100300
• [学会発表] Structural Basis of Actin Polymerization, ATPase activation and Delayed Phosphate Release (2010)
  • 著者名/発表者名: K. Murakami, T. Yasunaga, T. Q. P. Noguchi, Y. Gomibuchi, K. Ngo, T. Q. P. Uyeda, and T. Wakabayashi
  • 学会等名: Oral Presentation The 48_<th> Biophysics Society of Japan Annual meeting
  • 発表場所: Sendai
  • 年月日: 2010-09-20