感染応答タンパク質の高度保存のための酸素バブリング・アルデヒド 新規免疫電顕固定法

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22580048
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 植物病理学
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 朴 杓允 神戸大学, 大学院・農学研究科, 名誉教授 (20147094)
• 研究分担者: 池田 健一 神戸大学, 大学院・農学研究科, 准教授 (40437504)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 酸素バブリング / 感染応答タンパク / 糖タンパク / グルタルアルデヒド / 微細構造 / 冠根 / トルイジン青 / 液胞

研究概要

優れた細胞像を得られる化学固定法を開発した。植物に酸素バブリングとアルデヒド(GA)固定を30分行うと、糖タンパクの保存が従来法より促進され、タンパクを高度に保全できた。植物細胞の細胞膜、オルガネラ膜と基質、細胞成分の固定は極めてよい。特に固定の難しいとされるミトコンドリア内膜と基質の保存に成功した。しかし、酸素バブリング・GA固定が免疫電顕法に利用できるかどうかは現在のところまだ明らかにされなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Zinc compounds potentiated mycovirus transmission by attenuation of heterogenic incompatibility in Rosellinia necatrix. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ikeda, K., Inoue, K., Kida,C., Uwamori,T., Sasaki, A., Kanematsu, S., Park, P
  • 雑誌名: Applied and Environmental Microbiology 巻: (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dysfunction of mitotic cell division at shoot apices triggered severe growth abortion in interspecific hybrids between tetraploid wheat and Aegilops tauschii (2012)
  • 著者名/発表者名: Hatano,H., Mizuno N.,Matsuda,R.,Shitsukawa, N.,Park, P., Takumi, S.
  • 雑誌名: New Phytologist 巻: 194 ページ: 1143-1154
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative study of ultrathin section shrinkage in various epoxy blocks:Sectioning from Spurr's block causes shrinkage in the longitudinal direction (2012)
  • 著者名/発表者名: Inoue,K., Morita,Y., Kanematsu,S., Park,P., Ikeda,K
  • 雑誌名: Journal of Electron Microscopy Technology for Medicine and Biology 巻: 26 ページ: 8-11
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytological evaluation of the effect of azoxystrobin and alternative oxidase inhibitors in Botrytis cinerea (2012)
  • 著者名/発表者名: Inoue,K.,. Tsurumi,T., Ishii,H., Park,P., Ikeda,K
  • 雑誌名: FEMS Microbiology Letters 巻: 326 ページ: 83-90
  • 査読あり
• [雑誌論文] In situlocalization of avenanthramide A and its biosynthetic enzyme in oat leaves infected with the crown rust fungus (2011)
  • 著者名/発表者名: Uchihashi,K,. Nakayashiki,H., Okamura,K., Ishihara, A., Tosa,Y. Park,P., Mayama, S.
  • 雑誌名: Puccinia coronataf . sp.Avenae, Physiological and Molecular Plant Pathology 巻: 76 ページ: 173-181
  • 査読あり
• [雑誌論文] Autoimmune responses and repression of mitotic cell division occuring inter-specific crosses between tetraploid wheat and Aegilops tauschiiCoss. That show low temperature-induced hybrid necrosis (2011)
  • 著者名/発表者名: Mizuno,N., Shitsuka,N., Hosogi,N., Park,P., Takumi S
  • 雑誌名: The Plant Journal 巻: 68 ページ: 114-128
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytological analysis of mycelial incompatibility in Helicobasidium mompa. (2011)
  • 著者名/発表者名: Inoue, K., Kanematsu,S., Park, P. ,Ikeda,K
  • 雑誌名: FEMS Microbiology Letters 巻: 315 ページ: 94-100
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytological analysis of mycelial in compatibility in Rosellinia necatrix (2011)
  • 著者名/発表者名: Inoue, K., Kanematsu,S., Park,P., Ikeda, K
  • 雑誌名: Fungal Biology 巻: 115 ページ: 87-95
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetic analysis of barrage line formation during mycelial incompati- bility in Rosellinia necatrix (2011)
  • 著者名/発表者名: Ikeda,K., Inoue, K., Nakamura, H.,Hamanaka, T., Ohta,T., Kitazawa,H.,Kida,C.,Kanematsu, S., Park, P
  • 雑誌名: Fungal iology 巻: 15 ページ: 80-86
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced Effects of non- isotopic hafnium chloride in methanol as a substitute for uranyl acetate in TEM contrast of ultrastructure of fungal and plant cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ikeda,K., Inoue,K., Kanematsu,S., Horiuchi, Y., Park,P
  • 雑誌名: Microscopy Research and Technique 巻: 74 ページ: 825-830
  • 査読あり
• [学会発表] 15th 化学からみた TEM・SEM 生物試料作製法の原則 (2013)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 細胞構造研究会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20130208-09
• [学会発表] 電顕アーティファクト (2013)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 理化学研究所横浜研究所
  • 発表場所: 植物電子顕微鏡若手ワークショップ
  • 年月日: 20130115-16
• [学会発表] 代替電子染色の現状 (2012)
  • 著者名/発表者名: 池田健一、井上加奈子、嘉久大毅、朴杓允
  • 学会等名: 第25回医学生物学電子顕微鏡技術学会研修会
  • 発表場所: 鳥取
  • 年月日: 20120823-25
• [学会発表] 細胞を読む(活性酸素とカビ病原性) (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 第25回医学生物学電子顕微鏡技術学会研修会
  • 発表場所: 鳥取
  • 年月日: 20120823-25
• [学会発表] Genetic analysis on mycelial incompatibility in Rosellinia necatrix (2012)
  • 著者名/発表者名: Ikeda,K.,Inoue,K.,Nakamura,H.,Kanematsu,S., Park,P
  • 学会等名: 9thInternational Mycological Congress
  • 発表場所: Edinburgh
  • 年月日: 20120801-06
• [学会発表] Cytological analysis on mycelial incompatibility in Rosellinia necatrix (2012)
  • 著者名/発表者名: Inoue,K., Ikeda, K., Kanematsu, S., Park, P.
  • 学会等名: 9th International Mycological Congress
  • 発表場所: Edinburgh
  • 年月日: 20120801-06
• [学会発表] 酢酸ウランの染色機序 (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会・第12回電顕シンポジウ
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2012-11-26
• [学会発表] アルデヒドの固定機序 (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 近畿電顕技術情報交換会
  • 年月日: 2012-11-25
• [学会発表] (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 化学固定剤の固定機序医学生物学電子顕微鏡技術学会・第13回 電顕シンポジウム
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-11-24
• [学会発表] 細胞を読む (基調講演) (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会・第13回電顕シンポジウム
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-11-24
• [学会発表] TEM 生物試料作製の原則 (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 24回 Bio 電顕セミナー
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-02-24
• [学会発表] TEM 生物試料作製の原則 (2012)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 第24回 Bio 電顕セミナー
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-02-23
• [学会発表] 14thTEM 生物試料作製法の原則 (2011)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 電顕講習会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20111104-06
• [学会発表] TEM のアーテイファクト (2011)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允
  • 学会等名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会・第12回電顕シンポジウム
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2011-11-26
• [学会発表] 生物組織の超薄切片における酢酸ウランと塩化ハフニウムの電子染色性比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 池田健一,井上加奈子,堀内喜高,兼松聡子,朴杓允
  • 学会等名: 医学生物学電子顕微鏡技術学会第26回学術講演会
  • 発表場所: 別府
  • 年月日: 20100514-16
• [図書] 透過電子顕微鏡生物試料作製講座 電子顕微鏡 技術講座シリーズ1(動画 DVD) (2011)
  • 著者名/発表者名: 朴杓允 監修:朴杓允,村中祥悟
  • 出版者: 株式会社モルフォバイオイメージング研究所