研究課題
本研究課題は、応募者らが独自に開発した希少糖およびその誘導体の生産技術を発展させて、希少糖のみを構成単位とする新規の二糖およびオリゴ糖を生産する技術を開発するための基盤研究である。本研究では、生理活性が解明され、用途開発の発展性の高い、希少糖D-アロースから、D-アロースのみを構成単位とする新規二糖およびオリゴ糖を生産する方法を開発する。本研究では単糖から合成できるホスホリラーゼに焦点を当て、酵素反応条件を工夫することで受容体として認識できることがわかったD-アロースから二糖(アロシルアロース)、オリゴ糖(アロオリゴ糖)までの一連の生産法の確立と、その技術を他の希少糖にも応用することを目指している。・D-プロース1-リン酸の合成法の確立生産に用いる材料に用いるD-アロースを十分量生産した。また、アロキナーゼによるD-アロースとATPからD-アロース6-リン酸の生産を諌みた。HPLC(既存の機器)を用い、分析カラムには昭和電工社製NH2P-4Eのイオン交換モードを用いることで、D-アロース6-リン酸の生産が確認できた。しかし、D-アローズ6-リン酸からD-アロース1-リン酸の生産では非常に効率が悪いため、アロース1-リン酸を生産する微生物のスクリーニングを行った。グルコース1-リン酸またはD-アロースを出発原料に用い、異性化してD-アロース1-リン酸に変換する微生物のスクリーニングを行い、一菌株の乳酸菌の生産する酵素がD-アロースからD-アロース1-リン酸に変換できること見出した。現在、D-アロース1-リン酸の生産を進めるとともに、D-グルコース1-リン酸からの生産について引き続きスクリーニングを行っている。
2: おおむね順調に進展している
D-アロース1-リン酸を生産するための酵素を生産する微生物のスクリーニングに成功しているため
D-アロース1-リン酸が不安定なため、D-アロース1-リン酸を出発原料にして二糖を合成するのが困難であると考えられる。このため、二糖を生産原料に用い、炭素第3位の酸化還元を利用した合成方法の確立を急いでいるところである。すでに、その酵素を生産する微生物が特定されているため合成は可能であるが、より効率のよい酵素を得るために自然界からの微生物のスクリーニングを進めていく予定である。
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Journal of Bacteriology
巻: 193 ページ: 2053-2057
Bioscience, Biotechnology and Biochemistry
巻: 75 ページ: 1006-1009
