エストロゲンオルトキノンの定量法開発と乳がんの発がん機構解析への応用

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22590041
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 物理系薬学
• 研究機関: 東北薬科大学
• 研究代表者: 山下 幸和 東北薬科大学, 薬学部, 教授 (80382670)
• 研究分担者: 大野 賢一 東北薬科大学, 薬学部, 講師 (20347272) ; 加藤 創 東北薬科大学, 薬学部, 助教 (80584458) ; 小松 祥子 東北薬科大学, 薬学部, 助手 (00438566)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 乳がん / エストロゲン / オルトキノン / フェナジン誘導体 / 質量分析 / 分析化学

研究概要

カテコールエストロゲンが酵素的あるいは非酵素的に酸化されて生成するオルトキノンを、フェナジン誘導体とすることにより、LC-MS により選択的に高感度で定量できることを見出した。この手法を活用して、カテコールエストロゲンからオルトキノン生成を触媒するタンパクや金属イオンを作用を確認することができた。さらに、乳がんのイニシエーションに重要と考えられる、オルトキノンの生体内タンパクとの付加体分析のモデル実験として、オルトキノンのグルタチオンや L-システインとの付加体の定量法を確立した。

研究成果

• [雑誌論文] Structures and biomimetic synthesis of a Novel α-pyrone polyketide of an endophytic Penicillium sp (2013)
  • 著者名/発表者名: T, Asai, D. Luo, K. Yamashita, Y. Oshima
  • 雑誌名: Catharanthus roseus, Org. Lett 巻: 15 ページ: 1021-1023
  • DOI: Doi:10.1021/ol303506t
• [雑誌論文] 18-Oxocortisol measurement in adrenal vein sampling as a biomarker for subclassifying primary aldosteroism (2011)
  • 著者名/発表者名: Y. Nakamura, F. Satoh, R. Morimoto, M. Kudo, K. Takase, C E. Gometz-Sanchez, S. Honma, M. Okuyama, K. Yamashita, W E. Rainey, H. Sasano, S.Ito
  • 雑誌名: J. Clin. Endcrinol. Metab 巻: 96 ページ: E1272-1278
  • DOI: Doi:10.1210/jc.2010-2785
• [雑誌論文] Assay of labile estrogen o-quinones, a potent carcinogenic molecular species, by high performance liquid chromatographyelectrospray ionization mass spectrometry with phenazine derivatization (2010)
  • 著者名/発表者名: K. Yamashita, A. Masuda, Y. Hoshino, S.Komatsu, M. Numazawa
  • 雑誌名: J. Steroid Biochem. Mol. Biol 巻: 119 ページ: 141-148
  • DOI: Doi:10.1016/j.jsbmb
• [学会発表] LC-ESI-MS/MS法による水酸化ステロイドのメタボローム解析(V)安定同位体標識カテコールエストロゲン-GSH 付加体の合成 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山下幸和、近藤恵美、白取未希、小松祥子、加藤創、大野賢一、沼澤光輝
  • 学会等名: 日本薬学会第133 年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-28
• [学会発表] Pyridine-carboxylates as protonaffinitive derivatives in HPLC-ESI-MS/MS analysis of hydroxysteroids (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Yamashita, S. Komatsu, H. Kato, K.-I.Ohno
  • 学会等名: 29^<th>LC/MS Montreux Symposium
  • 発表場所: Montreux
  • 年月日: 2012-11-09
• [学会発表] LC-ESI-MS/MS によるアロマターゼ活性測定法の開発および従来法との比較 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小松祥子、鈴木直樹、高橋透、山下幸和、沼澤光輝
  • 学会等名: 第51回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 青森
  • 年月日: 2012-10-07
• [学会発表] Use of proton-affinitive derivatization in HPLC-ESI-MS analysis of biologically important carboxylic acids (2012)
  • 著者名/発表者名: H. Kato, S. Mitsuzuka, K. Yamashita, M. Numazawa
  • 学会等名: 19^<th>International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2012-09-20
• [学会発表] LC-ESI-MS/MSによる水酸化ステロイドのメタボロム解析(IV)27 ステロイドの一斉分析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山下幸和、小松祥子、加藤創、大野賢一、沼澤光輝、本間誠次郎
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-30
• [学会発表] エストロゲンオルトキノンによるタンパク修飾(I)-L-Cys, N-Ac-L-Cys 及び GSH-共有結合体の調製とカテコール/キノン平衡 (2011)
  • 著者名/発表者名: 白取未希、加藤創、山下幸和、沼澤光輝
  • 学会等名: 第50回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2011-10-30
• [学会発表] An approach to the microdetermination of labile estrogen o-quinones by liquid chromatographyelectrospray ionization tandem mass spectrometry (2010)
  • 著者名/発表者名: K. Yamashita, S. Komatsu, A. Masuda, M. Numazawa
  • 学会等名: 58^<th>ASMS Confererence
  • 発表場所: Salt Lake City, USA
  • 年月日: 2010-05-25
• [図書] Testosterone: Biochemistry, Therapeutic Uses and Physiological Effects (2012)
  • 著者名/発表者名: K. Yamashita (ed. by Konstantin Chichinadze)
  • 総ページ数: 193
  • 出版者: Nova Scientific Publishers Inc
• [備考]
  • URL: http://www.tohoku-pharm.ac.jp/laboratory/rinsyob/index.html