| 研究概要 |
1.過酸化脂質由来の化学修飾アンジオテンシン(Ang)類の解析
・4-Oxo-2(E)-nonenal(ONE)由来の脱炭酸反応による、Ang II上のN末端アスパラギン酸におけるpyruvamide Ang II(AngP)形成(Lee et al., Chem. Res. Toxicol. 21 : 2237, 2008)に加え、ONEによるArg^2修飾及び4-hydroxy-2(E)-nonenal(HNE)によるHis^6修飾が起こることを明らかにした。さらに、これらの修飾メカニズムも、モデル反応解析(Lee et al., Chem. Res. Toxicol. 23 : 1771, 2010)による裏づけから同定することができた。
・4,5-Epoxy-2(E)-decenal(EDE)、及び4-hydroperoxy-2(E)-nonenal(HPNE)由来の修飾解析も現在進行中である。
2.Angと修飾Ang類分析のためのクリーンアップ法及びLC-MSの開発
・Ang及び修飾Ang類をモデルシステムあるいは生体試料から効率的に抽出するため、市販の抗Ang II抗体(ポリクローナル)を利用したAng類特異的なイムノアフィニティー精製法を開発した。
・質量分析法(MS)によるスクリーニング法、すなわちプリカーサーイオンスキャン(Goto et al., Anal. Methods, accepted)等のリンクドスキャンタンデムMS(MS/MS)を構築した。
3.修飾Ang類の生理活性の解析
・Ang Pは、Ang IIからAng IIIを生成するaminopeptidase A(APA)によっては代謝されないことが示唆された。
・Ang類のAT_1及びAT_2レセプターへの親和性を検討するため、MSを用いた非放射性レセプターアッセイ法を開発した。
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