過酸化脂質由来の化学修飾アンジオテンシンの解析:心血管系疾患への新規アプローチ

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22590130
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医療系薬学
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 李 宣和 東北大学, 大学院・薬学研究科, 助教 (60519776)
• 研究分担者: 大江 知行 東北大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (10203712) ; 後藤 貴章 東北大学, 大学院・薬学研究科, 講師 (40344684)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 臨床化学 / 酸化ストレス / 化学修飾 / アンジオテンシン

研究概要

アンジオテンシン(Ang)IIと過酸化脂質由来の親電子性分解物(4-oxo-2(E)-nonenal(ONE)及び4-hydroxy-2(E)-nonenal(HNE))の反応において、AngII上の主な修飾位置が、N-末端α-アミノ基、Asp^1、Arg^2およびHis^6である事を見出した。ONE由来の新規修飾AngIIとして、N-末端アスパラギン酸の脱炭酸及び脱アミノ化による生成物(pyruvamide-AngII)を同定した。次いで、得られた修飾AngIIの生物活性を精査するため、非放射性AngIItype1(AT1)レセプターアッセイ法及びアミノペプチダーゼ(AP)A酵素アッセイ法を、感度・選択性・スループットに優れ質量分析(MS)を活用して開発した。これらの結果より、AngIIのN-末端上の酸化修飾が、AT_1レセプター及びAPAとの相互作用を阻害する事を確認し、心血管系の機能調節に影響を与える可能性を示唆した。

研究成果

• [雑誌論文] Can Edman degradation be used for quantification? Isotope-dilution liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry and the long-term stability of 20 phenylthiohydantoin-amino acids (2013)
  • 著者名/発表者名: Satoh, R., Goto, T., Lee, S.H., Oe, T.
  • 雑誌名: Anal. Bioanal. Chem 巻: (in press)
  • DOI: DOI:10.1007/s00216-013-6901-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] MALDI-TOF/MS-based label-free binding assay for angiotensin II type1 receptor: application for novel angiotensin peptides (2013)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H., Masuda, T., Goto, T., Oe, T.
  • 雑誌名: Anal. Biochem 巻: 437 ページ: 10-16
  • DOI: DOI:10.1016/j.ab.2013.01.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Chemical modificomics: a novel strategy forefficient biomarker discovery through chemical modifications on a target peptide or protein (2012)
  • 著者名/発表者名: Goto, T., Kojima, S., Shitamichi, S., Lee, S.H., Oe, T.
  • 雑誌名: Anal. Methods 巻: 4 ページ: 1945-1952
  • DOI: DOI:10.1039/c2ay05841c
  • 査読あり
• [雑誌論文] Non-invasive proteomic analysis of human skin keratins: Screening of methionine oxidation in keratins by mass spectrometry (2011)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H., Miyamoto, K., Goto, T., Oe, T.
  • 雑誌名: J. Proteomics 巻: 75 ページ: 435-449
  • DOI: DOI:10.1016/j.jprot.2011.08.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of deuterium labeled analogs of 4-oxo-2(E)-nonenal (2011)
  • 著者名/発表者名: Arora, J. S., Oe, T., Blair, I. A.
  • 雑誌名: J. Labelled Compd. Radiopharm 巻: 54 ページ: 247-251
  • DOI: DOI:10.1002/jlcr.1860
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mass spectrometric characterization of modification to angiotensin II by lipid peroxidation products, 4-oxo-2(E)-nonenal and4-hydroxy-2(E)-nonenal (2010)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H., Takahashi, R., Goto, T., Oe, T.
  • 雑誌名: Chem. Res. Toxicol 巻: 23 ページ: 1771-1785
  • DOI: DOI:10.1021/tx100228q
  • 査読あり
• [雑誌論文] Combining [^<13>C_6]-phenylisothiocyanate and the Edman degradation reaction: a possible breakthrough for absolute quantitative proteomics together with protein identification (2010)
  • 著者名/発表者名: Oe, T., Maekawa, M., Satoh, R., Lee, S.H., and Goto, T.
  • 雑誌名: Rapid Commun. Mass Spectrom 巻: 24 ページ: 173-179
  • DOI: DOI:10.1002/rcm.4372
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of epoxyeicosatrienoic acids by chiral liquid chromatography/ electron capture atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry using [^<13>C]-analog internal standards (2010)
  • 著者名/発表者名: Mesaros, C., Lee, S.H., Blair, I.A.
  • 雑誌名: Rapid Commun. Mass Spectrom 巻: 24 ページ: 3237-3247
  • DOI: DOI:10.1002/rcm.4760
  • 査読あり
• [雑誌論文] Liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) of steroid hormone metabolitesand its applications (2010)
  • 著者名/発表者名: Penning, T.M., Lee, S.H., Jin, Y., Gutierrez, A., Blair, I.A.
  • 雑誌名: J. Steroid Biochem. Mol. Biol 巻: 121 ページ: 546-555
  • DOI: DOI:10.1016/j.jsbmb.2010.01.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] A simple and efficient approach to improve protein identification by the peptide mass fingerprinting method: Concomitant use of negative ionization (2010)
  • 著者名/発表者名: Sanaki, T., Suzuki, M., Lee, S.H., Goto, T., Oe, T.
  • 雑誌名: Anal. Methods 巻: 2 ページ: 1144-1151
  • DOI: DOI:10.1039/c0ay00215a
  • 査読あり
• [雑誌論文] Aldo-keto reductase 1C3 expression in MCF-7 cells reveals roles in steroid hormone and prostaglandin metabolism that mayexplain its over-expression in breast cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: Byrns, M.C., Duan, L., Lee, S.H., Blair, I.A., Penning, T.M.
  • 雑誌名: J. Steroid Biochem. Mol. Biol 巻: 118 ページ: 177-187
  • DOI: DOI:10.1016/j.jsbmb.2009.12.009
  • 査読あり
• [雑誌論文] A 13-oxo-9,10- epoxytridecenoate phospholipid analogue of the genotoxic 4,5-epoxy-2(E)-decenal: detection in vivo, chemical synthesis, and adduction with DNA (2010)
  • 著者名/発表者名: Mesaros, C., Gugiu, B.G., Zhou, R., Lee, S.H., Choi, J., Laird, J., Blair, I.A., Salomon, R.G.
  • 雑誌名: Chem. Res. Toxicol 巻: 23 ページ: 516-27
  • DOI: DOI:10.1021/tx9002484
  • 査読あり
• [雑誌論文] Major biliary bile acids of the Medaka (Oryzias latipes): 25R- and 25S- epimers of 3alpha,7alpha,12alpha- trihydroxy-5beta-cholestanoic acid (2010)
  • 著者名/発表者名: Hagey, L. R., Lida, T., Tamegai, H., Ogawa, S., Une, M., Asahina, K., Mushiake, K., Goto, T., Mano, N., Goto, J., Krasowski, M. D., Hofmann, A. F.
  • 雑誌名: Zoolog. Sci 巻: 27 ページ: 565-573
  • DOI: DOI:10.2108/zsj.27.565
  • 査読あり
• [学会発表] Novel lipid hydroperoxide- derived oxidized angiotensin peptides as potential biomarkers of cardiovascular disease (2012)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H.
  • 学会等名: Sendai Symposium on Analytical Sciences
  • 発表場所: Sendai, Japan
  • 年月日: 20121109-10
• [学会発表] Chemical modificomics: alternative analytical platform for efficient biomarker discovery (2012)
  • 著者名/発表者名: Oe, T.
  • 学会等名: Sendai Symposium on Analytical Sciences
  • 発表場所: Sendai, Japan
  • 年月日: 20121109-10
• [学会発表] LC-ESI/MS analysis of protein modification derived from a mixture of13-HPODE and [^<13>C_<18>]-13-HPODE (2012)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, R., Lee, S.H., Goto, T., Oe, T.
  • 学会等名: 19th International Mass Spectrometry Conference
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 20120915-21
• [学会発表] Targeted metabolomic analysis of modified angiotensin peptides as potential biomarkers of cardiovascular diseases (2012)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H.
  • 学会等名: The 60th Annual American Society for Mass Spectrometry (ASMS) Conference
  • 発表場所: Vancouver, Canada
  • 年月日: 20120520-24
• [学会発表] 過酸化脂質分解物4-hydroperoxy-2(E)-nonenalによるangiotensin II修飾反応の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高橋亮、李宣和、後藤貴章、大江知行
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120328-31
• [学会発表] 酸化ストレスによる生体高分子の化学修飾機構に関する研究。日本薬学東北支部 (2012)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H.
  • 学会等名: 第34回東北薬学セミナー
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2012-12-01
• [学会発表] 化学修飾スクリーニングを目的とした修飾ペプチドのフラグメンテーション解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 吉泉玲央奈、李宣和、後藤貴章、大江知行
  • 学会等名: 第51回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 青森
  • 年月日: 2012-10-07
• [学会発表] バイオマーカー探索を指向した化学修飾オミクス (2012)
  • 著者名/発表者名: 大江知行
  • 学会等名: 第52回日本臨床化学会年次学術集会
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 2012-09-08
• [学会発表] 非放射性レセプターアッセイによる酸化修飾アンジオテンシンIIとAT1レセプター結合能の評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 増田拓朗、李宣和、後藤貴章、大江知行
  • 学会等名: みちのく分析科学シンポジウム2012
  • 発表場所: 米沢
  • 年月日: 2012-07-21
• [学会発表] Pyridoxamine-mediated transamination of pyruvamide- angiotensin II, a novel angiotensin peptide derived from 4-oxo-2(E)- nonenal (2012)
  • 著者名/発表者名: 景賢淑、李宣和、後藤貴章、大江知 行
  • 学会等名: みちのく分析科学シンポジウム2012
  • 発表場所: 米沢
  • 年月日: 2012-07-21
• [学会発表] 効率的バイオマーカー探索基盤としての『化学修飾オミクス』 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大江知行
  • 学会等名: 第13回機能構造と分析化学シンポジウム
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2012-02-18
• [学会発表] Targeted metabolomic approach for cardiovascular diseases (2011)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H.
  • 学会等名: Fall International Convention of the Pharmaceutical Society of Korea
  • 発表場所: Incheon, Korea
  • 年月日: 20111107-09
• [学会発表] MALDI-TOF/MSを用いた非放射性レセプターアッセイ法の開発研究:酸化修飾アンジオテンシンIIとAT1レセプターの結合能の評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 増田拓朗、李宣和、後藤貴章、大江知行
  • 学会等名: 第50回日本薬学会東北支部大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20111029-30
• [学会発表] イオン化 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大江知行
  • 学会等名: The 38thBiological Mass Spectrometry Conference (BMS2011)
  • 発表場所: 箱根町
  • 年月日: 20110710-12
• [学会発表] Chemical modificomics: alternative analytical platform for efficient biomarker discovery (2011)
  • 著者名/発表者名: Oe, T.
  • 学会等名: International Symposium on Recent Advances in Drug Discovery and Development
  • 発表場所: Chongju, Korea
  • 年月日: 2011-11-18
• [学会発表] Novel lipid hydroperoxide-derived oxidized angiotensin peptides as potential modulators of cardiovascular functions (2010)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H., Takahashi, R., Goto, T., Oe, T.
  • 学会等名: The 12th Asian-Pacific Congress of Clinical Biochemistry
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 20101003-07
• [学会発表] 非侵襲的サンプリングによる表皮ケラチン分析と酸化修飾解析への応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮本浩平、李宣和、後藤貴章、大江知行
  • 学会等名: 日本分析化学会第59年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 20100915-17
• [学会発表] ELISA用抗体の交差反応性を利用した化学修飾オミクス (2010)
  • 著者名/発表者名: 大江知行
  • 学会等名: 日本分析化学会第59年会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2010-09-16
• [学会発表] 『真に価値ある分析科学の発展を目指して』私は研究をしているのか?～効率的バイオマーカー探索プラットフォームの構築～ (2010)
  • 著者名/発表者名: 大江知行
  • 学会等名: The 23th Biomedical Analytical Science Symposium(BMAS2010)
  • 発表場所: 松島町
  • 年月日: 2010-07-21
• [学会発表] バイオマーカー探索を指向したケミカルモディフィコミクスへのアプローチ (2010)
  • 著者名/発表者名: 後藤貴章
  • 学会等名: 平成22年度日本薬学会東北支部学術講演会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2010-07-10
• [図書] Lipid peroxide-DNA adducts (Chapter 11) in Penning, T.M. (Ed.) Chemical Carcinogenesis, in El-Deiry, W. (Series Ed.) Current Cancer Research (2011)
  • 著者名/発表者名: Lee, S.H., Blair, I.A.
  • 総ページ数: 227-244
  • 出版者: Springer Science+Business Media LLC
• [備考] 東北大学大学院薬学研究科臨床分析化学分野へようこそ
  • URL: http://www.pharm.tohoku.ac.jp/~bunseki/bunseki.html