K+チャネルの分解による発現量制御

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22590218
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生理学一般
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 岡田 誠剛 関西医科大学, 医学部, 講師 (40334677)
• 研究分担者: 松田 博子 関西医科大学, 医学部, 教授 (10181736)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 内向き整流性 K+チャネル / 分解 / ホメオスタティック制御

研究概要

イオンチャネルの発現量は、合成だけでなく分解によっても制御されている。内向き整流性K+チャネル(Kir2.1)は、心、血管、神経、免疫系に発現し、細胞の興奮性、シグナル伝達に関与するが、分解による発現制御は未解明である。これまで、タンパク分解の研究は、放射性同位元素や、タンパク合成阻害剤が用いられ、invivoでの研究は困難であった。我々は、2種の蛍光タンパク(SNAP-タグ、蛍光タイマー(FT))を用いて、Kir2.1の分解が、同チャネルの発現量(電流量)に応じて変化し、電流量をホメオスタティックに制御していること、並びに、蛍光タンパクを用いたタンパク分解分析法の有用性を明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Lentiviral and Moloney Retroviral Expression of Green Fluorescent Protein in Somatotrophs In Vivo. (2013)
  • 著者名/発表者名: Okada M, Matsuda H, Okimura Y
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 8(1) ページ: e54437
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0054437
  • URL: http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0054437
• [雑誌論文] Voltage-dependent block by internal spermine of the murine inwardly rectifying K+ channel, Kir2.1, with asymmetrical K+ concentrations. (2010)
  • 著者名/発表者名: Matsuda H, Hayashi M, Okada M
  • 雑誌名: J Physiol (London) 巻: 588 ページ: 4673-4681
  • DOI: doi:10.1113/jphysiol.2010.194480.
  • URL: http://jp.physoc.org/content/588/23/4673.long
• [雑誌論文] Genetically increased cell-intrinsic excitability enhances neuronal integration into adult brain circuits. (2010)
  • 著者名/発表者名: Lin CW, Sim S, Ainsworth A, Okada M, Kelsch W, Lois C
  • 雑誌名: Neuron 巻: 65 ページ: 32-39.
  • DOI: doi:10.1016/j.neuron.2009.12.001.
  • URL: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0896627309009787
• [学会発表] Current-dependent degradation of inwardly rectifying potassium channel, Kir2.1. Gordon Research Conference on (2012)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Okada, Masataka Kano, Hiroko Matsuda
  • 学会等名: Cell Biology of the Neuron
  • 発表場所: Waterville Valley, NH, USA.
  • 年月日: 20120624-29
• [学会発表] 内向き整流性K+チャネルを発現するレンチウイルスベクターのタイターは調製時のチャネル遮断で上昇する。 (2011)
  • 著者名/発表者名: 岡田誠剛、松田博子
  • 学会等名: 日本生化学会、近畿支部会
  • 発表場所: 守口、大阪府
  • 年月日: 2011-05-21
• [学会発表] 発現量に応じたKir2.1タンパク分解の亢進;蛍光タンパクを用いた測定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加納真孝、岡田誠剛、松田博子
  • 学会等名: 日本生理学会
  • 発表場所: 盛岡、岩手県
  • 年月日: 20100519-21