| 研究課題/領域番号 |
22590235
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| 研究機関 | 山形大学 |
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研究代表者 |
石井 邦明 山形大学, 医学部, 教授 (10184459)
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| 研究分担者 |
山崎 良彦 山形大学, 医学部, 准教授 (10361247)
蔦川 修生 山形大学, 医学部, 助教 (00551855)
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| キーワード | 受容体 / チャネル / エンドサイトーシス / シグナル情報伝達系 / 電位依存性Kチャネル |
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| 研究概要 |
ヒト心筋活動電位の再分極に重要な役割を演じているI_<ks>チャネル(Q1/E1チャネル)とGq蛋白共役型受容体(GqPCR)を培養細胞ならびにツメガエル卵母細胞に発現させ検討した。
1.電気生理学的検討によって、アンジオテンシン受容体1型(AT_1受容体)の活性化がI_<Ks>電流を抑制することは明らかであったが、生化学的および免疫組織化学的検討を行なったところ、そのQ1/E1電流の抑制にはQ1蛋白のエンドサイトーシスが関与していることが明らかになった。
2.各種阻害薬を用いた検討ならびに変異体の作製などの分子生物学的検討を行った結果、AT_1受容体刺激によるQ1蛋白のエンドサイトーシスにはPKCの活性化が関与していること、さらにQ1蛋白のC末端領域が重要な役割を演じていることが明らかになった。
3.他のGqPCRであるα_<1A>受容体を用いて検討したところ、AT_1受容体刺激の場合と同様にQ1/E1電流の抑制とQ1蛋白のエンドサイトーシスが起こることが明らかになった。そして、それらにはPKCの活性化が関与している可能性が考えられたが、AT_1受容体の場合と異なり、Q1蛋白のC末端領域の関与は明らかではなかった。
4.Q1蛋白のエンドサイトーシスにおいてその関与が報告されているユビキチン化について、変異体を用いた検討を行ったが、両受容体の場合ともユビキチン化の関与は否定的であった。
本年度得られた結果は、電位依存性K^+チャネルであるQ1/E1チャネルがGqPCRの活性化によってエンドサイトーシスされるという、これまでに知られていない調節機構を明らかにしたものである。
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