ミクロプロテオミクスによる細胞内と微小環境におけるC型肝炎ウイルス制御因子の解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22590350
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 江角 真理子 日本大学, 医学部, 准教授 (10147019)
• 研究分担者: 杉谷 雅彦 日本大学, 医学部, 教授 (40187654)
• キーワード: C型肝炎ウイルス / 感染制御 / 微小環境 / レーザーマイクロダイセクション / ブロテオミクス / ウイルス量 / 肝非実質

研究概要

1肝臓組織病理標本の選別
手術切除組織の新鮮凍結組織からRNAを抽出し、HCV RNAについてリアルタイムPCRにより定量した。肝硬変の有無により症例を分け、さらにそれぞれについて、ウイルス量が100倍以上異なる高ウイルス群と低ウイルス群に分類した。各群5症例計20症例について、HE染色像より実質および間質をみきわめ、マイクロダイセクション領域を検討した。
2レーザーマイクロダイセクション・LC-MS/MSの検討
既に先行していた肝細胞癌再発に関する実質および非実質のマイクロダイセクション・LC-MS/MS解析を、参考として検討してみた。実質と非実質との間で発現の異なるタンパク質が同定でき、さらにそれぞれ特徴的なタンパク質は、再発難易によって異なることがわかった。同様の解析をウイルス複製の難易で検討できる可能性が示された。
3ウイルス量の違いに関連する分子の機能解析
高ウイルス群で有意に発現亢進する遺伝子の中に細胞膜セリンプロテアーゼTMPRSS2を見いだしていた。一方Huh7/JFH1 HCVの培養細胞感染系で、血清が感染を抑制することを見いだした。血清成分中、α1アンチトリプシンが顕著に感染を阻害すること、ダイズ由来のトリプシンインヒビターも同様に感染を阻害することを見いだした。細胞膜トリプシン様プロテアーゼTMPRSS2がインフルエンザやSARSウイルスの感染性に大きく関与することが最近明らかにされており、C型肝炎ウイルスの感染性増強にも細胞膜プロテアーゼの関与が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] High TSC22D3 and low GBP1 expression in the liver is a risk factor for early recurrence of hepatocellular carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Takagi K, Takayama T, Nagase H, Moriguchi M, Wang X, Hirayamagi K, Suzuki T, Hasegawa H, Ochiai T, Yamaguchi N, Kochi M, Kimura M, Esumi M
  • 雑誌名: Experimental and Therapeutic Medicine 巻: 2 ページ: 425-431
  • 査読あり
• [雑誌論文] プロテオームとプロテオミクス (2010)
  • 著者名/発表者名: 間世田優文、江角真理子
  • 雑誌名: 脊椎脊髄ジャーナル 巻: 23 ページ: 553-555
• [学会発表] Liver microenvironment containing cytokeratin 19-positive cells associated with the early recurrence of hepatocellular carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Esumi M, Yamaguchi H, Kuroda K, Munekata Y, Obana Y, Takahashi R, Fuchinoue F, Sugitani M, Nagase H, Takemura T, Minowa T, Hanagata N, Nakayama H, Takayama T
  • 学会等名: The 3rd JCA-AACR Special Joint Conference-The Latest Advances in Liver Cancer Research : From Basic Science to Therapeutics
  • 発表場所: 舞浜
  • 年月日: 2011-03-02
• [学会発表] C型肝炎ウイルス感染に対する自然防御について (2010)
  • 著者名/発表者名: 江角眞理子、石橋真理子、鶴田浩一、山口裕美、菊田幸子、榊原由子、脇田隆字
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-11-07