| 研究課題/領域番号 |
22590362
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
西浦 弘志 熊本大学, 大学院・生命科学研究部, 助教 (90284760)
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| 研究分担者 |
荒木 喜美 熊本大学, 生命資源研究支援センター, 准教授 (90211705)
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| キーワード | S19リボソーム蛋白質 / 貧血マウスモデル / ノックインマウス / ダイヤモンドブラックファン貧血症 |
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| 研究概要 |
S19リボソーム蛋白質遺伝子異常が、先天性赤芽球癆ダイヤモンドブラックファン貧血症患者25%に発見された。我々は、赤血球形成におけるS19リボソーム蛋白質単量体の抗アポトーシス作用による増殖期分化細胞の維持とS19リボソーム蛋白質二量体のアポトーシス増幅作用による成熟期分化細胞の脱核を想定している。この理論は、S19リボソーム蛋白質遺伝子ノックアウトマウスが胎生致死であったととが増殖期分化細胞へのアポトーシス作用が想定される。一方、非機能性変異S19リボソーム蛋白質二量体産生をマウスに導入すると、正常機能性変異S19リボソーム蛋白質単量体により増殖期分化細胞は維持されるので胎生致死は免れ、脱核不全による赤芽球激減の再現が期待できる。この仮説を証明するために、非機能性変異S19リボソーム蛋白質二量体産生マウス作成の計画を立案する。
平成22年度の計画どおりに、マウスS19リボソーム蛋白質遺伝子の第5エクソン末端CAGをGAGに置換した変異マウスS19リボソーム蛋白質遺伝子をブルースクリプトベクターに導入した。変異マウスS19リボソーム蛋白質遺伝子は、エレクトロポレーション法を用い、ホモロガスリコンビネイションによりマウスES細胞に導入した。変異マウスS19リボソーム蛋白質遺伝子の導入をPCR法で確認したマウスES細胞は、アグリゲイション法によりファウンダーマウスへ生着させた。現在、変異マウスS19リボソーム蛋白質遺伝子の導入をPCR法で確認したヘテロマウスをB6マウスにバッククロスしている。
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