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2012 年度 実績報告書

ミトコンドリアプロテオームによる回虫呼吸鎖転換の網羅的解析

研究課題

研究課題/領域番号 22590383
研究機関順天堂大学

研究代表者

高宮 信三郎  順天堂大学, 医学部, 准教授 (90138206)

研究分担者 藤村 務  順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (70245778)
研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード低酸素適応 / ミトコンドリア / 好気的呼吸鎖 / 嫌気的呼吸鎖 / フマル酸還元酵素 / 寄生蠕虫 / マンソン裂頭条虫 / 回虫
研究概要

1) 本年度計画した以下の3つの課題、1)回虫感染幼虫(L3)およびC. elegans由来のシトクロム c 酸化酵素(複合体VI)の精製とサブユニット組成の解析、2)宿主の皮下織に寄生するマンソン裂頭条虫Spirometra erinaceieuropaeiプレロセルコイド(以下pleroと略す)の呼吸鎖解析、3) キノン結合蛋白の検索と同定、のうち、2)の課題について述べる。マンソン裂頭条虫の終宿主はイヌ、ネコなどで、その成虫は回虫成虫と同様、酸素分圧の低い宿主の腸管に寄生する。終宿主への感染は、その幼虫であるpleroを含むヘビなどの第二中間宿主を生で摂取することによるが、ヒトの場合、成虫にならずに幼虫のpleroのままで体内を移行し、いわゆる孤虫症を引き起こす。本研究では、シマヘビから採集したpleroおよびイヌから得た成虫からミトコンドリア(以下Mitと略す)をそれぞれ調製し、その呼吸鎖を比較解析した。すなわち、好気的呼吸鎖であるコハク酸酸化系の諸活性と嫌気的呼吸鎖であるNADH-フマル酸還元酵素活性を測定した。さらにMit中のユビキノン(UQ)とロドキノン(RQ)の量をHPLCを用いて定量した。その結果、成虫のNADH-フマル酸還元酵素のMit蛋白1mgあたりの活性はpleroの約25倍の値を示した。Pleroおよび成虫MitはいずれもRQ-10とUQ-10を含有し、RQが主成分であったが、キノンの総量は成虫のほうが多く、Mit蛋白あたりpleroの約6.2倍の含量であった。UQに対するRQの比(RQ/UQ)はpleroおよび成虫でそれぞれ4.9、30.5の値であった。これらの結果は、成虫Mitがplero Mitと比べてより嫌気的であることを示している。これまで、本条虫の呼吸鎖については不明な点が多くあったが、定量的な知見が得られた意義は非常に大きい。

現在までの達成度 (区分)
理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (1件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] 皮下組織および腸腔寄生蠕虫をモデルとしたハイポキシア耐性動物の生存戦略:寄生線虫ブタ回虫シトクロムb52012

    • 著者名/発表者名
      高宮信三郎
    • 雑誌名

      順天堂大学ハイテクリサーチセンター環境医学研究所紀要

      巻: 平成23年度 ページ: 43-46

  • [学会発表] Spirometra erinaceieuropaei ミトコンドリア呼吸鎖の生化学的解析2013

    • 著者名/発表者名
      高宮信三郎
    • 学会等名
      第82回日本寄生虫学会大会
    • 発表場所
      東京医科歯科大学 湯島キャンパス 東京
    • 年月日
      20130329-20130331
  • [学会発表] 寄生蠕虫ミトコンドリアの呼吸鎖:Spirometra erinaceieuropaei 成虫およびプレロセルコイドにおける比較解析2012

    • 著者名/発表者名
      高宮信三郎
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場、マリンメッセ 福岡市
    • 年月日
      20121214-20121216
  • [学会発表] 自活性線虫Caenorhabditis elegans およびブタ回虫Ascaris suum のシトクロムb5(様)蛋白の比較解析:Caenorhabditis elegans F58B4.2は回虫分泌型シトクロムb5の偽遺伝子化したホモログである2012

    • 著者名/発表者名
      高宮信三郎
    • 学会等名
      第72回日本寄生虫学会東日本支部会 第10回分子寄生虫マラリアフォーラム 合同大会
    • 発表場所
      群馬大学医学部 刀城会館 前橋市
    • 年月日
      20121012-20121013
  • [学会発表] 自活性線虫Caenorhabditis elegans のF58B4.2は偽遺伝子化した回虫分泌型シトクロムb5のホモログである2012

    • 著者名/発表者名
      高宮信三郎
    • 学会等名
      第6回蠕虫研究会
    • 発表場所
      青島サンクマール 宮崎市
    • 年月日
      20120727-20120728

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公開日: 2014-07-24  

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