日本脳炎ウイルスNS4Aによる病原性誘導機構の解明

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22590423
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 田島 茂 国立感染症研究所, ウイルス第一部, 主任研究官 (60311346)
• キーワード: 日本脳炎ウイルス / NS4A / 病原性

研究概要

これまでに申請者らは、野外ブタ血清から強毒性の日本脳炎ウイルス(JEV)を分離し、さらにこの株の強毒性がJEV非構造蛋白質NS4A上の1アミノ酸の違いに起因することを突き止めた(論文投稿中)。これはフラビウイルスの病原性発現にNS4Aが関与することを示す最初の知見である。しかしその作用機序は全くわからない。NS4Aによる病原性誘導機構を解明するため、1)NS4Aが1型インターフェロン経路の活性化に干渉する、2)ウイルス感染時のアポトーシス誘導に関与するかを探る、3)NS4Aと相互作用するウイルス側および細胞側因子を探索する。これらの結果を踏まえ、強毒性を引き起こす1アミノ酸置換がNS4Aの性状・機能に及ぼす影響を調べ、さらにマウス個体を用いてin vivoで検証する。以上により、日本脳炎ウイルスNS4Aによる病原性誘導機構の解明を目指す。
本年度申請者は、1型インターフェロン感受性細胞であるヒト肺がん由来A549細胞におけるNS4A蛋白1アミノ酸置換強毒型日本脳炎ウイルスの増殖性を調べてきた。結果としてインターフェロンβの有無に関わらず親株である中度毒性型日本脳炎ウイルスとの間に顕著な差異は確認されなかった(論文投稿中)。このことから、強毒性は1型インターフェロンとは無関係あるいは、in vivoなどより高次での解析でないと差異が検出できない可能性が考えられる。これらのことを踏まえ、次年度は動物への感染実験を行い、感染個体内でのウイルス動態ならびに宿主側の応答について解析を行なう予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Restoration of replication-defective dengue type 1 virus bearing mutations in the N-terminal cytoplasmic portion of NS4A by the additional mutations in the NS4B. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tajima, S., Takasaki, T., and Kurane, I.
  • 雑誌名: Archives of Virology 巻: 156 ページ: 63-69
• [雑誌論文] Molecular and virological analyses of dengue virus responsible for dengue outbreak in East Timor in 2005. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ito, M., Takasaki, T., Kotaki, A., Tajima, S., et al.
  • 雑誌名: Japanese Journal of Infectious Diseases 巻: 63 ページ: 181-184
  • 査読あり
• [雑誌論文] Importation of dengue virus type 3 to Japan from Tanzania and Cote d'voire. (2010)
  • 著者名/発表者名: Moi, M.L., Takasaki, T., Kotaki, A., Tajima, S., et al.
  • 雑誌名: Emerging Infectious Diseases 巻: 16 ページ: 1770-1772
  • 査読あり
• [学会発表] In vitroにおけるデング1型ウイルスおよび日本脳炎ウイルスの増殖性および感染細胞側応答の比較 (2010)
  • 著者名/発表者名: 田島茂、高崎智彦、倉根一郎
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: あわぎんホール(徳島県)
  • 年月日: 2010-11-07
• [学会発表] フラビウイルスレポーターレプリコンの構築 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博、田島茂、司馬肇、細野邦昭、高崎智彦、倉根一郎
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: あわぎんホール(徳島県)
  • 年月日: 2010-11-07
• [学会発表] ウイルス性状における日本脳炎ウイルスE蛋白質の1アミノ酸置換の影響 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山口幸恵、田島茂、小滝徹、澤辺京子、渡邊治雄、高崎智彦、倉根一郎
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: あわぎんホール(徳島県)
  • 年月日: 2010-11-07
• [学会発表] 日本脳炎ウイルス国内分離株の遺伝子解析(2005～2009) (2010)
  • 著者名/発表者名: 小滝徹、林昌宏、田島茂、高崎智彦, 倉根一郎
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: あわぎんホール(徳島県)
  • 年月日: 2010-11-07
• [学会発表] Effects of single amino acid substitution at position 123 in the Japanese encephalitis virus E protein on its growth rate in vitro and pathogenicity in mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tajima, S., Yamaguchi, Y., Kato, F., Takasaki, T., Kurane, I.
  • 学会等名: 1^<st> Asia-Pacific Workshop on Neurovirology
  • 発表場所: Seoul National University, (Seoul, South Korea)
  • 年月日: 2010-07-16
• [学会発表] 3'NTR内に変異を有する日本脳炎ウイルス変異体のin vitroにおける増殖性および病原性解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博、田島茂、山口幸恵、小滝徹、司馬肇、細野邦昭、高崎智彦、倉根一郎
  • 学会等名: 第45回日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: 国立感染症研究所(東京都)
  • 年月日: 2010-05-28
• [学会発表] 日本脳炎ウイルスE蛋白質の1アミノ酸置換(S123N)がウイルス増殖に及ぼす影響 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山口幸恵、田島茂、小滝徹、澤辺京子、渡邉治雄、高崎智彦、倉根一郎
  • 学会等名: 第45回日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: 国立感染症研究所(東京都)
  • 年月日: 2010-05-28