| 研究課題/領域番号 |
22590554
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| 研究機関 | 日本医科大学 |
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研究代表者 |
李 卿 日本医科大学, 医学部, 講師 (50250048)
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| 研究分担者 |
川田 智之 日本医科大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00224791)
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| キーワード | Ziram / Perforin / Granzyme A / Granzyme B / Granzyme 3/K / Granulysin / NK細胞 / カーバメイト系農薬 |
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| 研究概要 |
【目的】
平成22年度ではカーバメイト系農薬が有意にNK(natural killer)、LAK(lymphokine-activated killer)及びCTL(cytotoxic T lymphocyte)細胞活性を抑制することを明らかにした。
平成23年度ではカーバメイト系農薬によるNK細胞内のPerforin/Granzyme/Granulysin発現レベルへの影響を調べ、カーバメイト系農薬によるNK活性抑制の機序を検討した。
【材料と方法】
1.本研究ではNK細胞としてNK-92MI細胞を用いた。
2.カーバメイト系農薬はジラム(Ziram)を用いた。
3.In vitroにおいてジラムでNK細胞を一定の時間で処理した。
4.NK(細胞内のPerforin、Granzyme A、Granzyme B、Granzyme 3/K及びGranulysin発現レベルの測定
Flow cytometry法を用いてマウス抗ヒトPerforin、Granzyme A、Granzyme B及びGranzyme 3/K抗体による蛍光免疫染色法でNK細胞内のPerforin、Granzyme A、Granzyme B及びGranzyme 3/Kの発現レベルを測定した。Granulysin発現レベルの測定はウサギ抗人Granulysin抗体を用いた(Li et al.2005, 2006, 2008)。
【結果と考察】
ジラムが処理量に依存してNK細胞内のPerforin、Granzyme A、Granzyme B、Granzyme 3/K及びGranulysinの発現レベルを有意に低下させることを明らかにした。またGranzyme 3/KとGranulysinはPerforin、Granzyme A、Granzyme Bよりジラムの影響を受けやすいことも明らかにした。以上の結果より、ジラムがNK細胞内のPerforin、Granzyme A、Granzyme B、Granzyme 3/K及びGranulysinの発現レベルを低下させることによってNK活性を抑制したことが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
実験は計画通り実施してきた。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、カーバメイト系農薬ジラムによるNK細胞のアポトーシスとネクローシスを検討し、細胞死の視点からカーバメイト系農薬によるNK細胞活性抑制の機序を究明する。
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