|
本研究の目的は、吸入された黄砂の肺細胞への影響とその作用機構の解明である。炎症を介した酸化的損傷機構の関与を予測している。
平成22年度の計画は、黄砂そのもの、黄砂の成分、炎症に関係すると思われる付着微生物を不活化させた黄砂をマウスの気管内に投与し、肺組織の酸化的損傷と関連タンパク質を解析することであった。しかしながら、連携研究者から提供された手持ちの黄砂の量が少量であるため、これを使用する前に、最初の段階として予備実験を行うこととした。予備実験として5週令の雄ICRマウスをコントロール群と黄砂成分であるSiO_2群、Al_2O_3群、NiO_2群、及びこれらにそれぞれ炎症惹起性微生物の代わりとして、OVA(オボアルブミン)を加えた群の計8群に分け(n=5～6)、1週間ごとに4回生理食塩水中懸濁液として鼻から吸入投与した。各マウスの肺を取り出し、半分は標本用に回し、半分は8-oxodG測定用とタンパク質解析用に液体窒素で冷凍保存した。その結果の詳細は現在まだ得られていないが、組織標本には炎症がみられるものがある。OVAを加えた各群での炎症が明らかであり、その強さはSiO_2+OVA群>NiO_2+OVA群>Al_2O_3+OVA群>OVA群であった。まず組織標本での炎症観察、特異的抗体を用いた組織染色法によって8-ニトログアニンと8-oxodGの生成を測定してから、DNAおよびタンパク質を抽出して8-oxodGおよび関連タンパク質を分析する。これらの結果を生かして黄砂を使用する本実験を行う予定である。
|
