2013 年度研究成果報告書

組織切片上の微量ｍＲＮＡ検出を可能にするｉｎ　ｓｉｔｕ　ＲＴ－ＰＣＲ法の樹立

研究課題

研究課題/領域番号	22590634
研究種目	基盤研究(C)
配分区分	補助金
応募区分	一般
研究分野	法医学
研究機関	島根大学
研究代表者	栂とも子島根大学, 医学部, 技術専門職員 (20403462)
研究分担者	竹下治男島根大学, 医学部, 教授 (90292599)
研究期間 (年度)	2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード	in-situ RT-PCR / mRNA / in situ Hybridization / 川本法
研究概要	組織切片上の微量ｍRNAを検出するために逆転写PCRを行いcDNAを作成し、次にPCRで増幅し、それをラベルして、標的ｍRNAの局在を確認する条件検討を試みたが、増幅の確認ができず、in situ RT-PCRの手技実験を中止した。次にRNAを効率よく保存できると推測し、粘着フィルム（川本法）を利用した凍結切片を用いて、in situ Hybridizationを行った。粘着フィルムはin situ Hybridizationのプロトコルに強度的に耐えうるが、洗浄の際に組織が剥がれ落ちることが多く、またフィルムに染色残渣が残り、明確な標的ｍRNAの局在を確認ができなかった。