上皮増殖因子前駆体細胞内ドメインをターゲットとした新規薬剤開発

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22590704
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 谷田 諭史 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教 (30528782)
• 研究分担者: 城 卓志 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (30231369) ; 片岡 洋望 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (40381785)
• 連携研究者: 東山 繁樹 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (60202272)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: EGFファミリー / HB-EGF核移行シグナル / PLZF / Alphascreen assay

研究概要

【目的】近年進行大腸癌の罹患率は上昇し治療法の開発は急務である。進行大腸癌化学療法において、上皮増殖因子 (EGF)を標的とする薬剤の効果は限定的である。HB-EGFを介した細胞増殖機序には、HB-EGF-C末端 (HB-EGF-CTF)の核移行後promyelocytic leukemia zinc finger (PLZF)の核外へのくみだしによる増殖シグナルがある。HB-EGF-CTF核移行シグナル抑制薬を網羅的に探索し、HB-EGF-CTF核移行細胞増殖シグナルが大腸癌細胞増殖に果たす役割を検討した。【方法】GST-pull downおよびSurface plasmon resonance アッセイにてPLZFとHB-EGF-CTFの結合部位を特定した。HB-EGF-CTFとPLZFの結合阻害候補化合物探索のために、Alphascreen assayを確立した。細胞増殖は、増殖カーブにて検討し、HB-EGF-CTF、PLZF細胞内局在は蛍光免染を用いた。【結果】PLZFzing finger構造5-8がHB-EGF-CTF蛋白との特異的結合部位であった。Alphascreen assay解析結果から12種類の候補化合物、telmisartanおよびcandesartanが得られた。telmisartanは、濃度依存的にTPAによる細胞増殖を抑制した。一方、candesartanは、細胞増殖を抑制しなかった。HB-EGF-CTFおよびPLZFの局在は、telmisartanとcandesartanで前処置後TPA刺激を行うと、TPAによるHB-EGF-CTF核移行は、telmisartanのみで阻害できた。【結論】telmisartanやその誘導体によるHB-EGF-CTF核内移行シグナル抑制は、新たな大腸癌治療戦略になりうると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Telmisartan inhibits cell proliferation by blocking nuclear translocation of ProHB-EGF C-terminal fragment in colon cancer cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ozeki K, Tanida S, Morimoto C, Inoue Y, Mizoshita T, Tsukamoto H, Shimura T, Kataoka H, Kamiya T, Nishiwaki E, Ishiguro H, Higashiyama S, Joh T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8(2) ページ: e56770
  • DOI: doi:10.1371/journal.pone.0056770.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of cell proliferation induced by dual intracellular signaling of HB-EGF in the development of colitis-associated cancer during ulcerative colitis. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tanida S, Mizoshita T, Mizushima T,Shimura T, Kamiya T, Kataoka H, Joh T.
  • 雑誌名: Ulcers 巻: volume 2011 ページ: 6
  • DOI: doi:10.1155/2011/457637
  • 査読あり
• [雑誌論文] IBD 腸管炎症に関わる炎症性サイトカインによるEGF シグナルを介した大腸細胞増殖機序 (2011)
  • 著者名/発表者名: 谷田諭史、尾関啓司,塚本宏延 、溝 下 勤、片岡洋望、神 谷 武、城 卓志
  • 雑誌名: 潰瘍 巻: 38(2) ページ: 135-138
• [雑誌論文] HB-EGF-C末端核移行シグナルをターゲットにした新規薬剤探索と細胞増殖抑制機序 (2011)
  • 著者名/発表者名: 尾関啓司,谷田諭史,溝下 勤,水島隆史,志村貴也,村上賢治,平田慶和,片岡洋望,神谷 武,福田伸治,東山繁樹,城 卓志
  • 雑誌名: 消化器と免疫 巻: 47 ページ: 144-146
• [雑誌論文] TGFβ induces proHB-EGF shedding and EGFR transactivation through ADAM activation in gastric cancer cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ebi M, Kataoka H, Shimura T, Kubota E, Hirata Y, Mizushima T, Mizoshita T, Tanaka M, Mabuchi M, Tsukamoto H,Tanida S, Kamiya T, Higashiyama S, Joh T.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 19; 402(3) ページ: 449-54
  • DOI: DOI:10.1016/j.bbrc.2010.09.130
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intranuclear translocation signaling of HB-EGF carboxy-terminal fragment and mucosal defense through cell proliferation and migration in digestive tracts. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanida S, Kataoka H, Mizoshita T, Shimura T, Kamiya T, Joh T.
  • 雑誌名: Digestion. 巻: 82(3) ページ: 145-9
  • DOI: DOI:10.1159/000310903
  • 査読あり
• [雑誌論文] BCL6 degradation caused by the interation with the C-terminus of proHB-EGF induces cycline D2 expression in gastric cancers. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hirata Y, Ogasawara N, Sasaki M, Mizushima T, Mizoshita T, Shimura T,Mori Y, Kubota E, Wada T, Tanida S, Kataoka H, Kamiya T, Higashiyama S, Joh T
  • 雑誌名: British Journal of Cancer 巻: 100 ページ: 1320-1329
  • DOI: DOI:10.1016/S0016-5085(09)61447-5
  • 査読あり
• [学会発表] 大腸癌増殖シグナルHB-EGF-C 末端核移行をターゲットとした新規薬剤探索 (2012)
  • 著者名/発表者名: 尾関啓司、谷田諭史、溝 下 勤、塚本宏延、片岡洋望、城 卓志.
  • 学会等名: 第50回日本癌治療学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2012-10-25
• [学会発表] 炎症性サイトカイン(IL-8)によるHB-EGF-C末端核移行シグナルを介した大腸細胞増殖機序 (2012)
  • 著者名/発表者名: 尾関啓司、谷田諭史、溝下 勤、塚本宏延、片岡洋望、城 卓志
  • 学会等名: 第40回日本潰瘍学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-07-14
• [学会発表] TGFβによるROSおよびADAM17を介したEGF受容体transactivationのメカニズムの解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 海老正秀、片岡洋望、志村貴也、溝下 勤、谷田諭史、平田慶和、神谷 武、水島隆史、東山繁樹、城 卓志
  • 学会等名: JDDW 2011
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2011-10-21
• [学会発表] IBD 腸管炎症に関わる炎症性サイトカインによるEGF-C末端signalを介した大腸癌細胞増殖機序 HB-EGF-CTFシグナル抑制薬網羅的探索から- (2011)
  • 著者名/発表者名: 尾関啓司、谷田諭史、溝下 勤、塚本宏延、城 卓志
  • 学会等名: JDDW 2011
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2011-10-20
• [学会発表] HB-EGF-CTFの核内移行は胃癌浸潤を促進する (2011)
  • 著者名/発表者名: 志村貴也,吉田道弘,福田信治,溝下 勤,片岡洋望,東山繁樹,城 卓志
  • 学会等名: 第70回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-05
• [学会発表] IBD 腸管炎症に関わる炎症性サイトカインによるEGF signalを介した大腸癌細胞増殖機序 -EGF-C末端signalを標的とした新規薬剤探索- (2011)
  • 著者名/発表者名: 尾関啓司、谷田諭史、溝下 勤、塚本宏延、城 卓志
  • 学会等名: 第7回消化管学会総会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-02-18
• [学会発表] IBD 腸管炎症に関わる炎症性サイトカインによるEGFシグナルを介した大腸細胞増殖機序‐HB-EGF-C末端シグナルを標的とした網羅的薬剤探索‐ (2011)
  • 著者名/発表者名: 谷田 諭史、溝下 勤 、水島 隆史、城 卓志
  • 学会等名: 厚生労働省「難治性炎症性腸管障害に関する調査研究」平成22年度第2回総会 免疫関連バイオマーカーの開発.
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-01-28
• [学会発表] TGFbeta induces shedding of proHB-EGF and EGFR transactivasion though ADAM activation. (2010)
  • 著者名/発表者名: 海老正秀、城 卓志、神谷武、片岡洋望、久保田英嗣、溝下 勤、志村貴也、村上賢治、平田慶和、東山繁樹.
  • 学会等名: 第69回 日本癌学会総会 English Workshops
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-09-24
• [学会発表] HB-EGF-C末端核移行シグナルをターゲットにした新規薬剤探索と細胞増殖抑制効果について. (2010)
  • 著者名/発表者名: 尾関啓司、谷田諭史、福田信治、東山繁樹、城 卓志
  • 学会等名: 第47回日本消化器免疫学会総会 一般演題
  • 発表場所: 大津
  • 年月日: 2010-07-08
• [備考] 名古屋市立大学大学院医学研究科消化器代謝内科学ホームページ業績集
  • URL: http://www.ncu-shotai.ac/index.html