SIRT1を標的とする新しいメラノーマ治療の展開

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22591228
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 山下 利春 札幌医科大学, 医学部, 教授 (50167706)
• 研究分担者: 堀尾 嘉幸 札幌医科大学, 医学部, 教授 (30181530) ; 肥田 時征 札幌医科大学, 医学部, 助教 (90464487)
• キーワード: 悪性黒色腫 SIRT1 / B16F1メラノーマ細胞転移 / 細胞移動 / 転移

研究概要

ヒストンおよび転写因子を脱アセチル化するSIRT1は神経細胞の移動に関与する。同じ神経内分泌系細胞に属するメラノサイトとメラノーマ細胞においてもSIRT1が細胞質に発現し,SIRT1阻害薬は,メラノーマ細胞の移動と移植メラノーマの浸潤と転移を抑制すること見出した。本研究は,この新たな知見を基盤として,SIRT1の発現とメラノーマ細胞の移動と浸潤に対する効果を検討し,SIRT1阻害によるメラノーマの転移抑制の分子機構を明らかにし,メラノーマの転移を抑制する抗腫瘍薬としてのSIRT1阻害薬の評価を行う。B16F10細胞の移動には低分子量GTP結合タンパク質Rac1の活性化(GTP結合Rac1)が必要である。SIRT1のシグナル伝達経路の下流に活性化型Rac1が位置するかどうかを,SIRT1阻害薬やSIRT1-siRNAを用いて検討した。B16F1細胞やB16F10細胞の免疫染色の予備的検討ではSIRT1は細胞移動方向の突起部分の細胞膜直下でF-actinと共存していた。レンチウイルスベクターによりSIRT1-siRNAを恒常的に発現するB16F1細胞を作成した。in vitroでは,scratch assayとmatrigel migration assayを行い,コントロールB16F1細片に比べ細胞移動が少ないことを確認した。in vivoマウスモデル実験では,C57BL6マウスに移植したB16F1メラノーマ細胞は,SIRT1の発現が少ない場合転移しにくい。現在,高肺転移メラノーマ細胞株を作製中である。

研究成果

• [雑誌論文] Increased caspase-2 activity is associated with induction of apoptosis in IFN-betasensitive melanoma cell lines. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kamiya T, Yamashita T, et al.
  • 雑誌名: J Interferon Cytokine Res 巻: 30(5) ページ: 349-357
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rab7 is a critical mediator in vesicular transport of tyrosinase-relatoteinl in melanocytes. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hida T, Yamashita T, et al.
  • 雑誌名: J Dermatol 巻: 37 ページ: 1-10
  • 査読あり
• [雑誌論文] Melanoma-targeted chemo-thermo-immuno (CTI)-therapy using N-propionyl-4-S-cysteaminylphenol-magnetite nanoparticles elicits CTL response via heat shock protein-peptide complex release. (2010)
  • 著者名/発表者名: Sato A, Yamashita T, et al.
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 101 ページ: 1939-1946
  • 査読あり
• [学会発表] Inhibition of protein deacetylase SIRT1 suppresses in vitro and in vivo invasion of melanoma cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kunimoto R, Yamashita T, et al.
  • 学会等名: The 40^<th> Annual Meeting of the European Society for Dermatological Research (ESDR)
  • 発表場所: Helsinki, Finland
  • 年月日: 2010-09-11