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2011 年度 実績報告書

c-mycを標的腫瘍抗原とした固形癌診断血清抗体診断法の研究

研究課題

研究課題/領域番号 22591416
研究機関東邦大学

研究代表者

山崎 有浩  東邦大学, 医学部, 講師 (00307761)

研究分担者 島田 英昭  東邦大学, 医学部, 教授 (20292691)
キーワードSEREX / VEGF / p53 / ELISA / 固形癌 / 血清抗体 / 腫瘍マーカー
研究概要

(1)c-myccDNAの塩基配列をアミノ酸配列に変換し、MHCPredウェブサイト(http://www.jenner.ac.uk/MHCPred/)を用いてクラスII抗原部位を検索し、その領域を含むペプチドを人工合成する。始めにウエスタンブロット法にて、c-mycを標的とする血清抗体陽性率を検討した。
(2)次に、アミノ末端にビオチンを付加しておき、予めアビジンを子愛化したプレートを用いて合成ペプチドを特異的に結合させ、洗浄後に血清抗体と反応させ、ペルオキシダーゼ標識抗ヒトIgG抗体を用いて血清抗体レベルを測定した。健常者血清に比べ食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、膵臓癌、乳癌の6種の患者血清の抗体レベルが有意に高いペプチドを選択した。
(3)バキュロウイルスを用いてc-mycペプチドを精製して血清c-myc抗体検索のためのELISAキットを作成する。作成したELISAキットの性能試験を実施し、健常者の基準抗体価を設定した。健常者血清におけるELISA測定レベルの平均値+3SDをカットオフ値として、その値を上回ったものを陽性と判定した。
(4)東邦大学医療センター大森病院で入院・加療した胃癌患者の血清を文書により本人の了解を得てスクリーニングし用いた。解析対象の食道癌、胃癌、大腸癌、肝臓癌、膵臓癌、乳癌の患者血清を治療前後に採取し、血清分離後にマイナス80度で凍結保存したものを使用した。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

研究計画3年間の2年目であり、当初計画に基づく研究計画を順調に実施している。

今後の研究の推進方策

研究計画3年間の2年目であり、当初計画に基づく研究計画を順調に実施できた。しかしながら、血清中のc-myc抗体は、当初期待したレベルの陽性率に達しなかったため、単独で新たな腫瘍マーカーとして利用できる可能性は少ないと判断された。他の血清抗体マーカーとの重複陽性症例はほとんどないため、複数の抗体マーカーを併用することで、従来の抗体マーカーを凌駕する検査方法として開発できる可能性がある。研究最終年度である平成24年度には、最適の血清抗体併用方法を探索する予定である。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2011

すべて 雑誌論文 (2件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] 食道癌におけるバイオマーカー血液バイオマーカーの有用性について2011

    • 著者名/発表者名
      谷島聡, 山崎有浩, 島田英昭
    • 雑誌名

      消化器外科

      巻: 34(13) ページ: 1889-1895

  • [雑誌論文] p53抗体はどのくらい役に立つか?2011

    • 著者名/発表者名
      谷島聡, 山崎有浩, 島田英昭, 他2名
    • 雑誌名

      成人病と生活習慣病

      巻: 41(6) ページ: 750-752

  • [学会発表] 癌診療におけるp53抗体マーカーの有用性~PUBMED文献から~2011

    • 著者名/発表者名
      島田英昭、山崎有浩
    • 学会等名
      第73回日本臨床外科学会総会
    • 発表場所
      京王プラザホテル(東京都)
    • 年月日
      2011-11-17
  • [学会発表] Clinical utility of serum p53 antibody for patients with esophageal carcinoma2011

    • 著者名/発表者名
      Shimada H, Yamazaki K
    • 学会等名
      21st World Congress of the International Association of Surgeons, Gastroenterologists and Oncologists (IASGO2011)
    • 発表場所
      Keio Plaza Hotel, Tokyo
    • 年月日
      2011-11-12
  • [学会発表] 消化管癌症例における血清中抗Heat Shock Protein 70 IgG抗体の検出2011

    • 著者名/発表者名
      山崎有浩, 島田英昭
    • 学会等名
      第111回日本外科学会定期学術集会
    • 発表場所
      (紙上開催)
    • 年月日
      2011-05-26
  • [学会発表] Serum SEREX antibodies as new biomarkers for gastric cancer2011

    • 著者名/発表者名
      Shimada H, Yamazaki K
    • 学会等名
      9th International Gastric Cancer Congress
    • 発表場所
      Seoul, Korea
    • 年月日
      2011-04-21

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公開日: 2013-06-26  

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