ビオチン標識miRNAを用いたプルダウン法による食道癌関連遺伝子の同定と機能解析

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22591433
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 外科学一般
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 伊藤 佐智夫 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (30335624)
• 研究分担者: 岡 剛史 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (50160651) ; 大内田 守 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 准教授 (80213635)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 食道癌 / miRNA

研究概要

我々は食道癌予測マーカーを同定するため、食道癌臨床検体および食道癌細胞株のプロファイリングにより分化度・悪性度に関連するmiRNAの同定を行った。その結果、低分化細胞株においてmiR-29aおよびlet-7bの発現が高いことが分かった。本プルダウン法を用いてこれらのmiRNAの標的遺伝子を同定したところ、癌抑制遺伝子やアポトーシス関連遺伝子を標的として発現抑制していることが分かった。悪性度が高い食道癌細胞株においてこれらのmiRNAは高発現しており、癌の進行に関わっていることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Novel direct targets of miR-19a identified in breast cancer cells by a quantitative proteomic approach (2012)
  • 著者名/発表者名: Ouchida M, Kanzaki H, Ito S, Hanafusa H, Jitsumori Y, Tamaru S, Shimizu K
  • 雑誌名: PLoS One
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNA-21 correlates with tumorigenesis in malignant peripheral nerve sheath tumor (MPNST) via programmed cell death protein 4 (PDCD4) (2012)
  • 著者名/発表者名: Itani S, Kunisada T, Morimoto Y, Yoshida A, Sasaki T, Ito S, Ouchida M, Sugihara S, Shimizu K, Ozaki T
  • 雑誌名: J Cancer Res Clin Oncol ページ: 1501-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of direct targets for the miR-17-92 cluster by proteomic analysis (2011)
  • 著者名/発表者名: Kanzaki H, Ito S, Hanafusa H, Jitsumori Y, Tamaru S, Shimizu K, Ouchida M
  • 雑誌名: Proteomics ページ: 3531-9
  • 査読あり
• [学会発表] Identification of direct targets of microRNA-29a in esophageal cancer cells (2012)
  • 著者名/発表者名: 伊藤佐智夫、花房裕子、山本久美子、大内田守
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20121211-14
• [学会発表] Novel direct targets of miR-19a identified in breast cancer cells by a quantitative proteomic approach (2012)
  • 著者名/発表者名: 大内田守、神崎浩孝、伊藤佐智夫、実盛好美、花房裕子、田丸聖治、清水憲ニ
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20121211-14
• [学会発表] Search and identification of target genes for miR-19a (2012)
  • 著者名/発表者名: 山本久美子、伊藤佐智夫、花房裕子、大内田守
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20121211-14
• [学会発表] Identification of target genes for miR-19a by in vitro pull-down method (2012)
  • 著者名/発表者名: Kumiko YAMAMOTO, Sachio ITO, Hiroko HANAFUSA and Mamoru OUCHIDA
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20120919-21
• [学会発表] Identification of direct targets of microRNA-29a in Esophageal squamous cell carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Ito S, Hanafusa H, Ouchida M, Shimizu K
  • 学会等名: 第34回分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111213-16
• [学会発表] Proteomic analysis of target genes of miR-92-1 in lung cancer (2011)
  • 著者名/発表者名: Ouchida M, Kanzaki H, Ito S, Yamamoto K, Tamura S and Kenji Shimizu K
  • 学会等名: 第34回分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111213-16
• [学会発表] Identification and functional analysis of miR-19a target genes in lung cancers (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K, Ouchida M, Ito S, Hanafusa H and Kenji S
  • 学会等名: 第34回分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20111213-16
• [学会発表] Identification of true targets of miRNA-183 in lung cancers using labeled ds-miRNA in vitro pull-down assay (2010)
  • 著者名/発表者名: Sachio ITO, Hanafusa H, Mamoru OUCHIDA, and Kenji SHIMIZU
  • 学会等名: 第33回分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20101207-10
• [学会発表] プロテオーム解析による癌細胞でのmiR-17-92 clusterの新規標的タンパク質の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: Mamoru OUCHIDA, Hirotaka KANZAKI, Sachio ITO, Kumiko Yamamoto, Seiji Tamaru and Kenji SHIMIZU
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20101207-10
• [学会発表] 肺癌における標識microRNA-183を用いた標識遺伝子の同定 (2010)
  • 著者名/発表者名: 伊藤佐智夫、大内田守、清水憲二
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20100922-24
• [学会発表] 癌細胞におけるmiR-17-92 clusterの新規標的タンパク質のプロテオーム解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大内田守、神崎浩孝、伊藤佐智夫、清水憲二
  • 学会等名: 第69回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 20100922-24
• [学会発表] Identification of novel direct target of miR-19a in MCF-7 breast cancer cell (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirotaka KANZAKI, Mamoru OUCHIDA, Sachio ITO, Seiji TAMARU, Hiroko HANAFUSA, Yoshimi JITSUMORI, Takashi OKA and Kenji SHIMIZU
  • 学会等名: The AACR 101st Annual Meeting 2010
  • 発表場所: Washington, DC.(USA)
  • 年月日: 20100417-21
• [備考]
  • URL: http://molgenet.med.okayama-u.ac.jp/Molecular_Genetics/Welcome.html