| 研究課題/領域番号 |
22591491
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
藤井 久男 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (40156823)
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| 研究分担者 |
高木 都 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (00033358)
松吉 ひろ子 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (10448772)
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| キーワード | セロトニン4受容体 / モサプライド / 腸壁内神経 / 神経幹細胞 / 野生型ラット / 内肛門括約筋弛緩反射 / BrdU / DLX2 |
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| 研究概要 |
セロトニン4受容体の刺激薬である、モサプライドの作用の検討を野生型のラットで行った。モサプライドの投与は、局所投与と臨床応用を考えて飲水投与を行った。直腸の切離吻合モデル野生型ラットを作製し、1週目、2週目と腸壁内神経の再生・新生過程を免疫組織学的に観察した。その結果、腸壁内神経の再生は、局所投与と飲水投与で同じように神経の再生を抗NF抗体による免疫染色で確認した。この、再生した神経は、主としてNO作動性神経で、一部コリン作動性神経を含むという結果であった。さらに、吻合部の肉芽組織はモルモットと異なり広範囲に厚く形成された。この吻合部の組織切片を作製して、免疫染色を行った。抗PCNA抗体(細胞増殖マーカー)、抗DLX2抗体(神経幹細胞のマーカー)、抗SR4抗体(セロトニン4受容体)および抗NF抗体で陽性に染色された細胞の数を求めた。飲水投与の方が、局所投与に比べて神経新生の効果が強い傾向を示したが、どちらの投与方法でも、神経幹細胞から神経新生を起こす結果が得られた。さらに、モルモットと異なり、神経増殖マーカーであるBrdUを2週間飲ましたラットで、どちらの投与方法でも吻合部から3mm口側、肛門側の部位にも新生神経を認めた。ラットは、細胞増殖能が強いと思われる。一方、再生神経の生理機能の回復を確認するために、直腸伸展により誘発される内肛用括約筋弛緩反射は、ラットでは、外来神経の影響が強く、なおかつ実験時に使用するウレタン麻酔により抑制されてしまうので、確認することができなかった。ここまでの成果は、現在投稿準備中で、第53回日本平滑筋学会総会で発表する予定である。従って、次年度はGFPラットを使うよりは他の方法で、神経幹細胞(神経前駆細胞)がどこからくるのかを解明する予定である。
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