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脳血管障害は死因の第3位、患者数は第3位を占め、その治療法の開発は急務である。2005年より脳梗塞発症の急性期3時間以内にt-PA静注療法が開始されたが、脳血流の再灌流に対する神経細胞のストレス応答機構は明らかでない。我々の研究グループは、脳梗塞巣周辺のPenumbra領域での神経細胞死を抑制するような治療法開発を目指して研究を進めた結果、ラット中大脳動脈閉塞・再灌流モデルのPenumbra領域の神経細胞にMKP-1(MAP kinase phosphatase-1)が誘導されることを見出し、当該研究ではその意義を解析している。
本年度は、ラット初代培養神経細胞を用い、ウエスタンブロッテングおよびリアルタイムPCR法にて、低酸素/再酸素化ストレス時にMKP_1が発現誘導される事を確認した。また、ラット中大脳動脈閉塞(脳梗塞)モデルを用い、ウエスタンブロッテングおよびリアルタイムPCR法で、脳梗塞周囲の神経細胞にMKP-1が発現している事を確認した。更に、神経系細胞株(N1E115細胞)のテトラサイクリン誘導性(tet-on inducible)MKP-1強制発現系を構築した。現在、この強制発現系を用い、MKP-1の強制発現がストレス性MAP kinaseを抑制するという結果を得ている。
来年度は、この系を用いた解析を更に進め、MKP-1が上記のストレス性MAP kinaseを抑制することで神経細胞死を抑制するかを確認する。また、MKP-1の再酸素化ストレスによる誘導メカニズムの解析や、脳梗塞時の炎症反応におけるMKP-1の役割等を解析予定である。
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