| 研究課題/領域番号 |
22591910
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
藤 賢史 九州大学, 大学院・医学研究院, 助教 (20380397)
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| 研究分担者 |
中島 寅彦 九州大学, 大学病院, 講師 (00284505)
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| キーワード | 上皮細胞増殖因子 / 上皮細胞増殖因子受容体 / 頭頸部癌 / c-src / srcファミリーリン酸化酵素 |
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| 研究概要 |
前年度の研究で、緑茶カテキンの一種である天然ポリフェノール(-)-Epigallocatechin gallate (EGCG)によって、上皮細胞増殖因子受容体(EGFR)が活性化を伴わずに、膜表面から細胞質に移動(内在化)することが、頭頸部癌細胞株YCU-H891において示された。本年度はそのメカニズムとして注目している、非受容体型チロシンリン酸化酵素であるc-srcに注目し研究を進めた。
研究代表者らのこれまでの予備的な実験によって、EGCGはc-srcを活性化することが示されている。そこでYCU-H891細胞をその活性化阻害剤であるPP1(20μM)で前処理したところ、EGCGによるc-src活性化が抑制された。同じ条件下でEGFRの内在化を蛍光顕微鏡で観察したところ、EGCGによって誘導されるEGFRの内在化も抑制されることがわかった。これらの結果は、EGCGが誘導するEGFRの内在化にはc-srcが関与することを強く示唆するものである。
一方、c-srcはsrcファミリー(SFK)を形成するタンパク群の一つであり、ヒトでは約10種類のSFKが知られている。このうち、c-src、yes、fynは多くの細胞株で比較的普遍的に発現しているSFKであるが、分子腫によってEGCGによる活性化に差異があるかどうかは不明であった。そこで、これらの活性化(Y416リン酸化)を比較検討したところ、EGCG処理によっては、c-srcが優位に活性化されること那示された。この活性化の違いが、EGCGによるc-srcを活性化するメカニズムに関与していると予想されるので、次年度ではここに焦点を絞って検討を進める。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
EGFRの内在化の検討、およびそのメカニズムに関わるc-srcの活性化の検討を行っており、概ね達成できていると思われる。
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| 今後の研究の推進方策 |
最終年度では、当初の計画ではなEGFR内在化を誘導する物質のスクリーニングや、内在化の後のEGFRの局在、変化を検討する予定であった。しかし、c-srcの活性化に関するメカニズムそのものを追求することは普遍的なEGFRの(活性化を伴わない)内在化の解明につながると考え、計画を変更し、c-srcの活性化メカニズムの検討に重点の置く予定とした。具体的には、他のSFKとの差異として、N末端のアシル化に違いに着目しており、これが他のSFKよりもc-srcが優位に活性化されるメカニズムに関連がある可能性がある。この仮説に基づいて、研究を進める予定である。この中で、EGCG関連物質などの効果も併せて検討する。
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