マウス涙腺を用いた機能的3次元培養腺房の作製とその細胞生物学的検討

2012 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22591957
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 防衛医科大学校
• 研究代表者: 伊藤 正孝 防衛医科大学校, 医学教育部医学科専門課程, 准教授 (30534896)
• 研究分担者: 今城 純子 防衛医科大学校, 医学教育部医学科専門課程, 教授 (20223323) ; 唐澤 容子 防衛医科大学校, 医学教育部医学科専門課程, 助教 (60535540)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• キーワード: 3次元培養 / 再生医学 / 涙腺 / 発生分化

研究概要

マトリゲルなど、複数のマトリックスを用いて3次元培養をしたが、導管構造を作り出すことが困難であったため、涙腺上皮細胞をair-lift培養したところ数週間で角膜・結膜および皮膚様の構造物が生じた。次に、涙腺上皮細胞から分泌されている、上皮成長因子(EGF)と肝細胞成長因子(HGF)を、それぞれの阻害剤と組み合わせて投与したところ、EGFまたはHGFの一方を阻害した場合には、他方の増殖因子を投与しても増殖促進作用は弱く細胞死抑制効果も低下した。更に両者を阻害すると、全ての細胞が死滅した。以上の結果より、涙腺上皮細胞は培養環境で近縁の異なる組織に分化しうることが示唆され、分化・増殖には複数の因子が関与していることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Mature Dendritic Cell Suppression by IL- 1 Receptor Antagonist on Retinal Pigment Epithelium Cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Sugita S, Kawazoe Y, Imai A, Usui Y, Iwakura Y, Isoda K, Ito M, Mochizuki M
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci. 巻: 54巻 ページ: 3240-3249
  • DOI: DOI:10.1167/ iovs.12- 11483.
  • 査読あり
• [雑誌論文] A case of sebaceous adenoma of the eyelid showing excessively rapid growth (2013)
  • 著者名/発表者名: Takayama K, Usui Y, Ito M, Goto H, Takeuchi M
  • 雑誌名: Clin Ophthalmol 巻: 7巻 ページ: 667-670
  • DOI: DOI: 10.2147/OPTH.S42135.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phototoxicity of indocyanine green and Brilliant Blue G under continuous fluorescent illumination on cultured human retinal pigment epithelial cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Takayama K, Sato T, Karasawa Y, Sato S, Ito M, Takeuchi M
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci 巻: 53巻 ページ: 7389-7394
  • DOI: DOI:10.1167/ iovs.12- 10754.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Accumulation of secretory vesicles in the lacrimal gland epithelia is related to non-Sjogren' s type dry eye in visual display terminal users (2012)
  • 著者名/発表者名: Kamoi M, Ogawa Y, Nakamura S, Dogru M, Nagai T, Obata H, Ito M, Kaido M, Kawakita T, Okada Y, Kawakami Y, Shimmura S, Tsubota K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7巻
  • DOI: DOI:10.1371/ journal.pone.0043688.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of cultivated murine lacrimal gland epithelial cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi S, Kawakita T, Kawashima M, Okada N, Mishima K, Saito I, Ito M, Shimmura S, Tsubota K
  • 雑誌名: Mol Vis 巻: 18巻 ページ: 1271-1277
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dietary lactoferrin alleviates age-related lacrimal gland dysfunction in mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Kawashima M, Kawakita T, Inaba T, Okada N, Ito M, Shimmura S, Watanabe M, Shinmura K, Tsubota K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7巻
  • DOI: DOI:10.1371/ journal.pone.0033148.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 涙腺の形態と機能 (2012)
  • 著者名/発表者名: 伊藤正孝
  • 雑誌名: Frontiers in Dry Eye 巻: 7巻 ページ: 34-43
• [学会発表] Analysis of chemokines involved in the pathogenesis of dacryoadenitis in mice deficient for programmed cell death-1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakurai Y, Ito M, Karasawa Y, Usui Y, Hattori T, Goto H, Takeuchi M
  • 学会等名: ARVO2013 Annual Meeting
  • 発表場所: Seattle, USA
  • 年月日: 20130500
• [学会発表] 器官培養を用いた胎生後期マウス涙腺器官形成の成長因子依存性の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 唐沢容子、伊藤正孝、小林靖直、四ノ宮成祥、竹内大
  • 学会等名: 第117回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130400
• [学会発表] マウスマイボーム腺開口部焼灼による 機能不全モデル作成の試み (2013)
  • 著者名/発表者名: 伊藤正孝、石川聖、若栗隆志、播本幸三、唐沢容子、川北哲也、坪田一男、今城純子、竹内大
  • 学会等名: 第117回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130400
• [学会発表] PD- 1ノックアウトマウスに自然発症する涙腺炎のケモカイン発現解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 櫻井裕、伊藤正孝、唐沢容子、服部貴明、臼井嘉彦、後藤浩、本庶佑、竹内大
  • 学会等名: 第117回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20130400
• [学会発表] Regeneration of Mouse Lacrimal Gland after Severe Ischemia (2012)
  • 著者名/発表者名: Ito M
  • 学会等名: 第20回International Society for Eye Research
  • 発表場所: ベルリン
  • 年月日: 20120700
• [学会発表] PD- 1ノックアウトマウスに自然発症する涙腺顎下腺炎の加齢に伴う病態変化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 櫻井裕、伊藤正孝、服部貴明、臼井嘉彦、後藤浩、本庶佑、竹内大
  • 学会等名: 第12回 日本抗加齢医学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20120600
• [学会発表] 加齢マウスマイボーム腺の形態計測の試み (2012)
  • 著者名/発表者名: 伊藤正孝、唐沢容子、播本幸三、竹内大、今城純子、坪田一男、斎藤一郎
  • 学会等名: 第12回日本抗加齢医学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20120600
• [学会発表] Growth Factor-dependent Proliferation of Cultured Lacrimal Gland Epithelial Cells Derived from Embryonic and Newborn Mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Ito M, Karasawa Y, Harimoto K, Shinomiya N, Imaki J, Takeuchi M
  • 学会等名: ARVO2012 Annual Meeting
  • 発表場所: Fort Lauderdale, USA.
  • 年月日: 20120500
• [学会発表] Oxidative Stress Caused By Continuous Fluorescent Lamp Illumination and/ or Indocyanine Green On Cultured Human Reetinal Pigment Epithelial Cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Karasawa Y, Kato N, Ito M, Takeuchi M
  • 学会等名: ARVO2012 Annual Meeting
  • 発表場所: Fort Lauderdale, USA.
  • 年月日: 20120500
• [学会発表] 眼炎症疾患のメカニズム最前線 炎症は涙腺再生を促進するか? (2012)
  • 著者名/発表者名: 伊藤正孝
  • 学会等名: 第116回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20120400
• [学会発表] 発生期マウス涙腺由来培養上皮細胞における増殖の成長因子依存性について (2012)
  • 著者名/発表者名: 唐沢容子、伊藤正孝、播本幸三、竹内大、四ノ宮成祥
  • 学会等名: 第116回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20120400
• [図書] 再生医療叢書4 上皮・感覚器。(日本再生医療学会編) (2013)
  • 著者名/発表者名: 伊藤正孝
  • 出版者: 朝倉書店