| 研究課題/領域番号 |
22591970
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| 研究機関 | 藤田保健衛生大学 |
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研究代表者 |
山本 直樹 藤田保健衛生大学, 共同利用研究施設, 講師 (00267957)
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| 研究分担者 |
谷川 篤宏 藤田保健衛生大学, 医学部, 准教授 (40324412)
堀口 正之 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (70209295)
大熊 真人 藤田保健衛生大学, 医学部, 講師 (50329710)
宮地 栄一 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (90129685)
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| キーワード | 網膜再生 / 組織幹/前駆細胞 / p75NTR(CD271) / 網膜神経細胞 / 虹彩 / Cell Sort / 電気生理 / 幹細胞移植 |
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| 研究概要 |
マウスおよびヒト虹彩由来網膜幹/前駆細胞の効率的な継代維持培養法に関する研究結果として、虹彩を酵素処理して単離した様々な細胞を培養したところ、神経様細胞へ分化できる細胞とできない細胞(fibroblast様細胞)が混在することが明らかとなった。そこで、単離した虹彩由来細胞において、未熟な幹/前駆細胞は接着能力が高いという細胞特性を利用して短時間で培養ディッシュに接着した細胞のみを継続培養したところ、効率的に神経細胞への分化能を有する細胞が取得できるようになった。培地のコンディションは、ヒトプール血清、FBS、血清代替品、Growth Factorなどを含む基礎培地にTAT-Pep5などのApoptosisシグナル系阻害剤を添加することで、CD29、CD105、Sca-1などの幹細胞マーカーを発現する細胞が継代培養できるようになり、さらに一部の幹細胞マーカーは12継代まで保持できることが明らかとなった。平成23年度以降、さらに様々な因子の添加による網膜幹/前駆細胞における効率的な維持培養法を検討する。この組織幹細胞培養法が確立できれば,眼科領域のみならず自己の組織幹細胞を用いた様々な領域の再生医学・医療研究に大きく貢献することができる。
分化誘導細胞を用いてPatch Clamp法で検討した結果、レチノイン酸を分化誘導薬剤として用いた場合では、神経細胞に特異的な電位依存性Na^+チャネル(内向き電流)の発現を一部の細胞で確認できた。平成23年度以降、さらに様々な分化誘導条件の検討し、機能性網膜神経細胞への分化誘導に関する研究を継続して実施する。
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