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2012 年度 実績報告書

歯周病における上皮細胞の病態解析

研究課題

研究課題/領域番号 22592086
研究機関長崎大学

研究代表者

福間 裕  長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教務職員 (50253688)

研究分担者 坂井 詠子  長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (10176612)
岡元 邦彰  長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (10311846)
西下 一久  長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 助教 (20237697)
筑波 隆幸  長崎大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (30264055)
研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード歯肉上皮細胞
研究概要

歯周病は、細菌感染による歯肉上皮細胞の破綻とそれに続く免疫担当細胞によって引き起こされる疾患である。しかし上皮細胞の病態解析は免疫担当細胞の解析に比べ、殆ど行われていないのが現状である。本研究では、歯周病における上皮細胞での本酵素の生理学的・病理学的役割について解明を目指すものである。
I. 上皮細胞培養系における形態学的解析:エンドソーム・リソソーム特異的蛍光染色試薬リゾトラッカーを用いて解析を行った。歯周病原性細菌P.gingivalisを感染させた後、カテプシンC KO-マウス由来の上皮系培養細胞でエンドソーム・リソソームの空胞化の有無に関して形態学的観察を行なった。正常細胞はリゾトラッカーとP.gingivalisの局在が一致したが、カテプシンC KO-マウス上皮細胞ではP.gingivalisの局在したコンパートメントは空胞化が認められた。
II. 上皮細胞培養系における生化学的解析:我々が以前に行なったカテプシンE-KOマクロファージの実験では、リソソーム性膜タンパク質が野生型マクロファージに比べ、カテプシンE-KOマクロファージ内に蓄積し、逆に可溶性リソソーム酵素の細胞内量が減少し、培養液中への分泌が亢進していた。そこで、カテプシンC KO-マウス上皮培養細胞でも同様にこれらの膜タンパク質が蓄積しているか検討した。しかしながら、予想に反して両細胞には著しい差異が認められなかった。また、可溶性リソソーム酵素について細胞内酵素活性と細胞外分泌量を酵素活性も変化はなかった。さらにエンドソーム・リソソームのpHについて、リゾセンサーという蛍光プローブをエンドサイトーシスさせ、24時間後のpHについて解析を行なったが、著しい差は認められなかった。今後は細胞膜のタンパク質の変化について検討する予定である。

現在までの達成度 (区分)
理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (6件)

  • [雑誌論文] Emerging roles of cathepsin E in host defense mechanisms2012

    • 著者名/発表者名
      Yamamoto K, Kawakubo T, Yasukochi A, Tsukuba T
    • 雑誌名

      Biochim Biophys Acta

      巻: 1824 ページ: 105-112

  • [雑誌論文] Suppression of RANKL-dependent heme oxygenase-1 is required for high mobility group box 1 release and osteoclastogenesis.2012

    • 著者名/発表者名
      Sakai E, Shimada-Sugawara M, Nishishita K, Fukuma Y, Naito M, Okamoto K, Nakayama K, Tsukuba T
    • 雑誌名

      J. Cell. Biochem.

      巻: 113(2): ページ: 486-98,

    • DOI

      10.1002/jcb.23372.

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Role of the transcription factor Sp1 in regulating the expression of the murine cathepsin E gene.2012

    • 著者名/発表者名
      Okamoto K, Okamoto Y, Kawakubo T, Iwata J, Yasuda Y, Tsukuba T, Yamamoto K
    • 雑誌名

      J. Biochem.

      巻: 151(3): ページ: 263-272,

    • DOI

      10.1093/jb/mvr135

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The Coffee Diterpene Kahweol Prevents Osteoclastogenesis via Impairment of NFATc1 Expression and Blocking of Erk Phosphorylation.2012

    • 著者名/発表者名
      Fumimoto R, Sakai E, Yamaguchi Y, Sakamoto H, Fukuma Y, Nishishita K, Okamoto K, Tsukuba T
    • 雑誌名

      J. Pharmacol. Sci.,

      巻: 118(4): ページ: 479-486,

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Deltamethrin inhibits osteoclast differentiation via regulation of heme oxygenese-1 and NFATc1.2012

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto H, Sakai E, Fumimoto R, Yamaguchi Y, Fukuma Y, Nishishita K, Okamoto K, Tsukuba T
    • 雑誌名

      Toxicol. in Vitro

      巻: 26, ページ: 817-822,

    • DOI

      10.1016/j.tiv.2012.05.005

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cathepsin E is critical for proper trafficking of cell surface proteins2012

    • 著者名/発表者名
      Tsukuba T., Okamoto K., and Yamamoto K
    • 雑誌名

      J Oral Biosci.

      巻: 54 ページ: 48-53,

    • DOI

      10.1016/j.job.2011.10.001

    • 査読あり
  • [学会発表] Cafestol prevents osteoclastogenesis via impairment of NFATc1 expression and blocking of Erk phosphorylation2013

    • 著者名/発表者名
      Fukuma Yutaka, Sakai Eiko, Sugawara Megumi, Erika Yoneshima, Nishishita Kazuhisa, Okamoto Kuniaki, and Tsukuba Takayuki
    • 学会等名
      第86回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      20131214-20131216
  • [学会発表] Up-regulation mechanisms of endosomal/lysosomal proteins during osteoblast differentiation2013

    • 著者名/発表者名
      Erika Yoneshima, Kuniaki Okamoto, Eiko Sakai, Noriaki Yoshida, and Takayuki Tsukuba
    • 学会等名
      第86回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      20130321-20130323
  • [学会発表] フィセチンはRANKLを介したROSの産生とNFATc1の発現を抑制することで破骨細胞分化を阻害する2012

    • 著者名/発表者名
      坂井詠子,菅原めぐみ,福間裕,西下一久,岩竹真弓,米嶋枝里香,岡元邦彰,筑波隆幸
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会合同大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      20121214-20121216
  • [学会発表] p53はカテプシンE遺伝子の発現を制御する2012

    • 著者名/発表者名
      岡元邦彰,岩田淳一,坂井詠子,西下一久,山本健二,筑波隆幸
    • 学会等名
      第85回日本生化学会大会合同大会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      20121214-20121216
  • [学会発表] Fisetinの破骨細胞形成と骨吸収活性への影2012

    • 著者名/発表者名
      坂井詠子,菅原めぐみ,福間裕,西下一久,岡元邦彰,筑波隆幸
    • 学会等名
      第54回歯科基礎医学会学術大会
    • 発表場所
      福島県小郡市、奥羽大学
    • 年月日
      20120914-20120916
  • [学会発表] Cafestolの破骨細胞形成と骨吸収活性への影響2012

    • 著者名/発表者名
      福間裕,坂井詠子,菅原めぐみ,西下一久,岡元邦彰,筑波隆幸
    • 学会等名
      第54回歯科基礎医学会学術大会
    • 発表場所
      福島県小郡市、奥羽大学
    • 年月日
      20120914-20120916

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公開日: 2014-07-24  

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