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唾液腺細胞を用いた三次元構造の再構築は再現性が非常に難しく、最終年度も再検討を行った。今までの結果から唾液腺細胞が極性配列を呈しやすかったコラーゲンスポンジ（テルダーミス®）とマトリゲル®を混合したもの用い、唾液腺細胞の腺管様配列と関連が深かったIV型コラーゲンをコーティング処理したものを三次元的骨格の土台として用いた。i) 完全な腺様構造の形態は獲得できなかったが、細胞同士の接着（デスモソームタンパクやカドヘリンの出現）やわずかながら分枝の数の増加が認められた。この効果はHGF>ｂFGFであることが改めて確認できた。ii)細胞内小器官の発達に関与する細胞増殖因子に関しては、腺様構造の形態と同様な結果が得られ、効果はHGF>ｂFGFであることが確認できた。iii)機能評価のマーカーとして用いたアミラーゼ、アクアポリンはともにHGFとｂFGFの刺激により誘導が促進され、その効果はHGF>ｂFGFであった。ムチンの発現は認めなかった。
三次元構築した唾液腺細胞のマウスへの自己移植については、唾液腺被膜下や固有唾液腺内への埋没法など、種々の方法にて試みるも再現性がある方法を確立することが難しく、新たな手法を用いることが課題である。
上記のことより、唾液腺細胞が3次元構築を示すにあたり重要な因子としてIV型コラーゲンとHGFの関連が示唆されるが、さらなる促進を図るためにはマウス唾液腺周囲由来の線維芽細胞を用いるなど、唾液腺細胞と間葉系の細胞接着や相互作用等を検討したり、また利用することが今後必要と考えている。
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