| 研究概要 |
顎関節の炎症病態関連因子の検索を目的として，培養ヒト顎関節滑膜由来線維芽細胞様細胞（滑膜細胞）にIL-1βまたはTNF-αを作用させた時の，microRNAとmRNAの遺伝子発現プロファイルの比較検討を行った．【方法】本学倫理委員会の指針に従い，顎関節内障患者の滑膜から滑膜細胞を得た．IL-1またはTNF刺激滑膜細胞と無刺激滑膜細胞からAGPC法でtotal RNAを抽出後，miRNA発現量はmiRXplore microarray，mRNA発現量はAffimetrix HG-focus Arrayを用いて測定した．遺伝子発現解析はGeneSpringを用いた．miRNAの標的遺伝子はIPA, TargetScan等のデータベースを用いて検索した．【結果および考察】約800 のヒトmature miRNA の発現量について調べたところ，IL-1刺激により2倍以上発現変動したのは7 miRNA，TNFにより2倍以上発現変動したのは41 miRNA であった。IPA Target Filterを用いて発現変動したmiRNAの標的候補遺伝子を検索した．IL-1で変動した７miRNAの標的遺伝子として7,136 遺伝子が候補にあがり，そのうち実験で検証されたものは18 遺伝子であった．TNFで発現変動した41 miRNAの標的遺伝子として27,225遺伝子が報告にあがり，そのうち実験で検証されたのは508 遺伝子であった．実験的に検証された標的遺伝子GeneSpringにimportし、DNA microarray 解析結果と比較した．Importした標的遺伝子でIL-1またはTNFによって発現変動していた遺伝子群にはCOX2等が認められた．【結論】滑膜細胞は、IL-1β、TNF-αによりmicroRNAの発現が変動し、mRNAの発現を制御している可能性が示唆された．
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