哺乳類の雌雄生みわけに関する新技法の開発に関する研究

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22650095
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 実験動物中央研究所 (2011); 財団法人実験動物中央研究所 (2010)
• 研究代表者: 橋本 晴夫 実験動物中央研究所, バイオメディカル研究部, 研究員 (30353478)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• キーワード: 動物実験技術 / 体外受精 / 胚移植 / 雌雄生み分け

研究概要

本研究目的は、従来困難とされていた哺乳動物の雌雄生みわけを可能にする新しい方法の開発である。そのための第一段階として実験動物のマウスで検討を行う。すなわち、生殖工学的生産にマウスの雌雄50(%):50の性比に人為的な偏りをかけることにより、雄あるいは雌を多く作製する技術の開発を試みた。
先ず、Y精子体部にはSRYタンパクが分泌されていると報告されていたので、SRY抗体とCy3の複合体を精子のいる培地へ加え、蛍光顕微鏡下で観察してみた。その結果、Cy3による蛍光を発している精子と蛍光を発していない精子が観察された。さらに蛍光を発している精子をピックアップし、顕微授精を行ったところ、36匹のマウス乳子のうち31匹の雄マウスを得ることができた(86.1%)。次に、Cy3を磁気ビーズに置き換え精子のいる培地へ添加し、磁力によりSRY抗体-磁気ビーズと結合した精子を培地底面に引き寄せ、X精子が多く存在していると思われる培地上部を体外受精に用いた。その結果、平均67.3%の比率で雌を多く生産することができた。
従って、雄の生み分けにはSRY抗体-Cy3複合体を用いたICSIが有効であると言える。一方、雌の生産のための磁気ビーズによる分離を用いた方法は、その比率が少し低く改善の余地が求められるものの、2つ以上の変異遺伝子マウスを作製時に、最初の体外受精で多くのホモあるいはヘテロ雌を作製する場合には有効であると思われる。

研究成果

• [雑誌論文] Study on establishment of congenic strains and screening of characteristics in IRS-2 deficient mice to support translational research on type 2 diabetes (2011)
  • 著者名/発表者名: Haruo HASHIMOTO
  • 雑誌名: Experimental animals 巻: 60巻 ページ: 21-32
  • DOI: DOI:10.1538/expanim.60.21
  • 査読あり
• [雑誌論文] db/dbマウスの系統比較から考察されるレジスチンの役割 (2011)
  • 著者名/発表者名: 橋本晴夫、新井敏郎、川井健司、鬼頭千佳、大美典子、早川絵里、水島友子、樋口裕一郎、江袋美知、末水洋志、日置恭司、斎藤宗雄、伊藤守、小坂樹徳
  • 雑誌名: 実験動物技術 巻: 46巻 ページ: 11-18
  • URL: http://ci.nii.ac.jp/naid/10029381001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vinyl isolator breeding induces insulin resistance in C57BL/6JJcl mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Haruo HASHIMOTO, Susumu EBUKURO, Ryoko NOZU, Masami UENO, Toshiro ARAI, Kenji KAWAI, Hiroshi HIRATA, Maya OGAWA, Takuma MIZUSAWA, Kuniyasu IMAI, Yuichiro HIGUCHI, Hiroshi SUEMIZU, Mamoru ITO, Muneo SAITO, and Kyoji HIOKI
  • 雑誌名: Experimental animals 巻: 60巻 ページ: 497-508
  • DOI: DOI:10.1538/expanim.60.497
  • 査読あり
• [学会発表] アイソレーター飼育はC57BL/6JJclマウスにインシュリン抵抗性を引き起こす (2011)
  • 著者名/発表者名: 橋本晴夫、江袋進、野津量子、植野昌未、新井敏郎、川井健司、平田裕、小川麻耶、水澤卓馬、末水洋志、伊藤守、齊藤宗雄、日置恭司(実中研,日獣大)
  • 学会等名: 第58回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-05-26