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2012 年度 実績報告書

世界最初の触媒機能を有する酵素型亜鉛フィンガー蛋白質の創出

研究課題

研究課題/領域番号 22651085
研究機関同志社女子大学

研究代表者

杉浦 幸雄  同志社女子大学, 薬学部, 教授 (40025698)

研究分担者 根木 滋  同志社女子大学, 薬学部, 助教 (50378866)
研究期間 (年度) 2010-04-01 – 2013-03-31
キーワード亜鉛フィンガー / DNA認識 / DNA切断 / 触媒機能 / 加水分解 / 酵素類似 / 機能変換 / 分子設計
研究概要

本年度は、高効率なDNA塩基配列選択的切断能を有する新規亜鉛フィンガータンパク質の説計・創製として、6個の(Cys2His2)型亜鉛フィンガーモチーフの真ん中に(His4)型亜鉛フィンガーモチーフを導入したマルチ7亜鉛フィンガータンパク質を遺伝子工学を駆使して作製・精製を行った。また、本新規マルチ亜鉛フィンガータンパク質のDNA切断能、すなわちヌクレアーゼ機能について、電気泳動法を用いて定量的に評価した。その結果、触媒中心である(His4)型亜鉛フィンガーモチーフの前後のそれぞれ3つの(Cys2His2)型亜鉛フィンガーモチーフによって認識されたDNA塩基配列の間のDNA配列が切断されていることが明らかになった。それ故、任意の塩基配列を(Cys2His2)型亜鉛フィンガーモチーフによって認識・結合させ、次いで塩基配列の近傍を(His4)型亜鉛フィンガーモチーフによって切断する新しい塩基配列切断能を有するヌクレアーゼの分子設計が達成されることが示された。本亜鉛フィンガータンパク質は、ペプチド結合を切断するぺプチダーゼ機能を持っていることは明白であるが、残念ながら詳細な科学的追求は十分できなかった。

現在までの達成度 (区分)
理由

24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2012

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Zn(II) binding and DNA binding properties of ligand-substituted CXHH-type zinc finger proteins2012

    • 著者名/発表者名
      M.Imanishi
    • 雑誌名

      Biochemistry

      巻: 51 ページ: 3342-3348

    • DOI

      dx.doi.org/10.1021/bi300236m

    • 査読あり
  • [学会発表] GAGA metallofinger peptide: Its metal-binding, DNA-binding and redox properties2012

    • 著者名/発表者名
      根木 滋
    • 学会等名
      6th ABICC
    • 発表場所
      Hong Kong
    • 年月日
      20121106-20121106

URL: 

公開日: 2014-07-24  

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