研究課題
Na+/H+交換輸送体(NHE1)の活性制御にはフォスファチジルイノシトール-2リン酸(PIP2)結合ドメインを含む膜直下領域が重要である。本研究課題前までの研究によって、NHE1はこの脂質結合ドメイン（LID)がdiacylglycerolやphorbol esterと直接結合することよって活性調節を受けることが示唆された。そこで、本研究では、①NHE1の活性化を阻害する薬物の同定、②NHE1がATPによって制御される機構について、研究を進めた。①NHE1の活性化を阻害する薬物の同定。staurosporineやphorbol esterの化学構造に基づいてインシリコバーチャルスクリーニングを行い、市販の化合物から可能性のあるものをピックアップしたのち、実際にNHE1活性化をブロックするかどうかを検証した。その結果、staurosporineに代表されるようなインドロカルバゾール環骨格を有する化合物のみがNHE1の活性化を阻害することが判明した。また、プロテインキナーゼC(PKC)を阻害する薬物の多くが、NHE1の活性化を阻害しないことが判明し、活性化がPKCを介するものではないという私達の仮説を支持した。NHE1を阻害する化合物はLIDに直接結合することが判明した（論文投稿中）。②NHE1がATPによって制御される機構。NHE1は二次性能動輸送体であり、ATP加水分解のエネルギーを必要としないが、不思議なことに細胞内ATPが無いと生理的なNHE1活性は失われる。このATP要求性はLIDが関与する可能性がある。SF9細胞よりNHE1を精製したNHE1がazido-[32P]ATPによってATPによって阻害されるような光架橋を受けること、その結合ドメインがLIDであることが判明した。ATPがNHE1の直接的な制御因子であることが示唆された（FEBS J, 2013）。
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Journal of Molecullar and Cellullar Cardiology
巻: in press ページ: in press
10.1016/j.yjmcc.2013.02.007
FEBS Journal
巻: 280 ページ: 1430-1442
10.1111/febs.12138
Biochemical Journal
巻: 450 ページ: 179-187
10.1042/BJ20121515
Muscle & Nerve
巻: 47 ページ: 372-378
10.1002/mus.23632
Trends in Cell & Molecular Biology
巻: 7 ページ: 99-110
Molecular and Celllar Biology
巻: 32 ページ: 3265-3280
10.1128/MCB.00145-12
Jounal of Biological Chemistry
巻: 287 ページ: 23852-23863
10.1074/jbc.M111.328708
Trends in Cardiovascular Medicine
巻: 22 ページ: 12-17
10.1016/j.tcm
