抗原特異的T細胞由来のヒトiPS細胞を用いた新しい細胞治療法の開発

2010 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 22659058
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 中内 啓光 東京大学, 医科学研究所, 教授 (40175485)
• キーワード: 抗原特異的T細胞 / iPS細胞 / 幹細胞

研究概要

(1)、細胞障害性T細胞由来ips(T-ips)細胞の樹立
研究初年度である本年は、がん抗原あるいはウイルス抗原に特異的な細胞障害性T細胞由来ips細胞の樹立を試みた。テトラマー法あるいは抗原ペプチド刺激によるサイトカイン補足法によって抗原反応性細胞をフローサイトで単離することができた。抗原非特異的なCD8 T細胞、各種のがん抗原あるいはウイルス抗原に反応性のある新鮮分離CD8 T細胞、繰り返し抗原刺激によって得られたCD8 T細胞、ペプチドによるクローン化済みCD8 T細胞などをソースとして、各種ウイルスベクターによる山中因子導入を行い、CD8陽性T細胞をリプログラミングするために必要な因子と培養条件を絞り込んだ。しかし現時点では新鮮CD8 T細胞を用いてもリプログラミング効率が0.001%程度であり、少数の抗原特異的CD8 T細胞から確実にips細胞を樹立するための手法を引き続き開発する。
(2)、TCR遺伝子再構成を持つT-ips細胞からの細胞障害性Tリンパ球の誘導
抗原非特異的な手法で得られたT-iPS細胞をソースに、in vitroならびにin vivoの双方の系を用いて成熟分化T細胞を得ることを試みた。in vitroにおいて、既報ではES細胞をCD4/CD8両陽性T細胞より先の成熟段階に分化誘導することは困難とされているが、サイトカインとフィーダーの最適化により、CD4あるいはCD8陽性のT細胞分画を得ることが出来た。また、in vivoにおいてNOD/JAK3(-/-)マウスをレシピエントとすることで、ヒト胎児胸腺を用いずにCD4あるいはCD8陽性のT細胞分画を得ることが出来た。現在はこれらの細胞の機能解析を行うとともに、抗原特異的CD8 T細胞に由来するips細胞をソースに成熟分化T細胞の誘導を試みている。

研究成果

• [雑誌論文] Development of defective and persistent sendai virus vector : a unique gene delivery/expression system ideal for cell reprogramming. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishimura K, Sano M, Ohtaka M, Furuta B, Umemura Y, Nakajima Y, Ikehara T, Kobayashi T, Segawa H, Takayasu S, Sato H, Motomura K, Uchida E, Kanayasu-Toyoda T, Asashima M, Nakauchi H, Yamaguchi T, Nakanishi M.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 11 ページ: 4760-71
  • 査読あり
• [雑誌論文] Downregulation of ZEB1 and overexpression of Smad7 contribute to resistance to TGF-beta 1-mediated growth suppression in adult T-cell leukemia/lymphoma. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nakahata S, Yamazaki S, Nakauchi H, Morishita K.
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 29 ページ: 4157-69
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reprogramming adult hematopoietic cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kaneko S, Otsu M, Nakauchi H.
  • 雑誌名: Curr Opin Hematol 巻: 17 ページ: 271-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of rat pancreas in mouse by interspecific blastocyst injection of pluripotent stem cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Yamaguchi T, Hamanaka S, Kato-Itoh M, Yamazaki Y, Ibata M, Sato H, Lee YS, Usui J, Knisely AS, Hirabayashi M, Nakauchi H.
  • 雑誌名: Cell 巻: 3 ページ: 787-99
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transient activation of c-MYC expression is critical for efficient platelet generation from human induced pluripotent stem cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takayama N, Nishimura S, Nakamura S, Shimizu T, Ohnishi R, Endo H, Yamaguchi T, Otsu M, Nishimura K, Nakanishi M, Sawaguchi A, Nagai R, Takahashi K, Yamanaka S, Nakauchi H, Eto K.
  • 雑誌名: J Exp Med 巻: 20 ページ: 2817-30
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduction of N-Glycolylneuraminic Acid in Human Induced Pluripotent Stem Cells Generated or Cultured under Feeder- and Serum-Free Defined Conditions. (2010)
  • 著者名/発表者名: HayashiY, Chan T, Warashina M, Fukuda M, Ariizumi T, Okabayashi K, Takayama N, Otsu M, Eto K, Furue MK, Michiue T, Ohnuma K, Nakauchi H, Asashima M.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 23 ページ: e14099
  • 査読あり