マウス指向性C型肝炎ウイルスを用いた感染動物モデルの樹立

2011 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 22659145
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 坂本 直哉 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 寄附講座教員 (10334418)
• 研究分担者: 柿沼 晴 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 寄付講座教員 (30372444) ; 中川 美奈 東京医科歯科大学, 医学部附属病院, 助教 (30401342)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• キーワード: HCV / CD81

研究概要

我々は、HCV培養系を用いて未だ報告されていないマウス指向性HCV株の樹立を目的として本研究を遂行した。蛍光蛋白eYFPを挿入したHCV-JFH1ウイルスHuh7細胞にて高効率に感染、増殖し、その感染はCD81抗体で阻害された。本ウイルスの長期の培養により安定してウイルス蛋白・蛍光蛋白を発現する細胞株を樹立し得た。本研究の成果を元に、さらに種々の遺伝子導入・改変マウスを用いた新たな小動物モデルの樹立を目指す。

研究成果

• [雑誌論文] Suppression of hepatitis C virus replicon by adenovirus vector-mediated expression of tough decoy RNA against miR-122a (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakurai F, Furukawa N, Higuchi M, Okamoto S, Ono K, Yoshida T, Kondoh M, Yagi K, Sakamoto N, Katayama K, Mizuguchi H
  • 雑誌名: Virus Research
  • DOI: DOI:10.1016/j.virusres.2012.02.003
• [雑誌論文] Identification of novel N-(morpholine-4-carbonyloxy) amidine compounds as potent inhibitors against hepatitis C virus replication (2012)
  • 著者名/発表者名: Kusano-Kitazume A, Sakamoto N(equalcontribution), Okuno Y, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Kakinuma S, Kiyonashi K, Nitta S, Murakawa M, Azuma S, Nishimura-Sakurai Y, Hagiwara M, Watanabe M
  • 雑誌名: Antimicrob Agent Chemother 巻: 56(3) ページ: 1315-1323
• [雑誌論文] Use of human hepatocyte-like cells derived from induced pluripotent stem cells as a model for hepatocytes in hepatitis C virus infection (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Takayama K, Kondoh M, Sakurai F, Tani H, Sakamoto N, Matsuura Y, Mizuguchi H, Yagi K
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 416(1-2) ページ: 119-124
• [雑誌論文] Adenovirus vector-mediated assay system for hepatitis C virus replication (2011)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Kondoh M, Ojima M, Mizuguchi H, Yamagishi Y, Sakamoto N, Yagi K.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res 巻: 39(10) ページ: e64
• [雑誌論文] Analysis of interferon signaling by infectious hepatitis C virus clones with substitutions of core amino acids 70 and 91 (2011)
  • 著者名/発表者名: Funaoka Y, Sakamoto N(equal contribution), Nakagawa M, Kakinuma S, Suda S, Watanabe T, Nitta S, Kitazume A, Kiyohashi K, Murakawa M, Azuma S, Tsuchiya K, and Watanabe M
  • 雑誌名: J Virol 巻: 85(12) ページ: 5986-5994
• [雑誌論文] Studies on virus kinetics using infectious fluorescence-tagged hepatitis C virus cell culture (2011)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto M, Sakamoto N, Nakamura T, Itsui Y, Nakagawa M, Nishimura-Sakurai Y, Kakinuma S, Azuma S, Tsuchiya K, Kato T, Wakita T, Watanabe M
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 41 ページ: 258-269
• [雑誌論文] Association between lipid accumulation and the cannabinoid system in Huh7 cells expressing HCV genes (2011)
  • 著者名/発表者名: Toyoda M, Kitaoka A, Machida K, Nishinakagawa T, Yada R, Kohjima M, Kato M, Kotoh K, Sakamoto N, Shiota G, Nakamuta M, Nakashima M, Enjoji M
  • 雑誌名: Int J Mol Med 巻: 27 ページ: 619-624
• [雑誌論文] シクロフィリン阻害剤 (2011)
  • 著者名/発表者名: 中川美奈、坂本直哉、渡辺守
  • 雑誌名: 肝胆膵 巻: 62 ページ: 403-412
• [雑誌論文] IL-6-mediated intersubgenotypic variation of interferon sensitivity in hepatitis C virus genotype 2a/2b chimeric clones (2010)
  • 著者名/発表者名: Suda G, Sakamoto N, Itsui Y, Nakagawa M, Tasaka-Fujita M, Funaoka Y, Watanabe T, Nitta S, Kiyohashi K, Azuma S, Kakinuma S, Tsuchiya K, Imamura M, Hiraga N, Chayama K, Watanabe M
  • 雑誌名: Virology 巻: 407 ページ: 80-90
• [雑誌論文] Cell culture and in vivo analyses of cytopathic hepatitis C virus mutants (2010)
  • 著者名/発表者名: Mishima K, Sakamoto N, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Kiyohashi K, Kitazume A, Tsuchiya K, Imamura M, Hiraga N, Chayama K, Wakita T, Watanabe M
  • 雑誌名: Virology 巻: 405 ページ: 361-369
• [雑誌論文] HCVの複製・増殖機構と遺伝子型・遺伝子変異 (2010)
  • 著者名/発表者名: 筬島裕子、中川美奈、坂本直哉
  • 雑誌名: 日本臨床 巻: 69 ページ: 52-58
• [学会発表] A high-content screening assay using infectious fluorescence-tagged hepatitis C virus reveals candidates for small molecule inhibitors of viral entry (2011)
  • 著者名/発表者名: Kusano-Kitazume A, Sakamoto N, Okuno Y, Yamamoto M, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Kakinuma S, Kiyohashi K, Nitta S, Murakawa M, Hagiwara M, Watanabe M
  • 学会等名: 62th. Annual Meeting of American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, CA.(Poster# 383)
  • 年月日: 2011-11-04
• [学会発表] EYFP発現HCV培養系を用いたHigh-content screening assayによるウイルス侵入阻害剤の同定.(ポスターP26) (2011)
  • 著者名/発表者名: 北詰晶子、坂本直哉、奥野友紀子、中川美奈、柿沼晴、山本満千、幾世橋佳、新田沙由梨、村川美也子、萩原正敏、渡辺守
  • 学会等名: 第15回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2011-10-20
• [学会発表] Cell based high-throughput screeningによる新規抗ウイルス小分子の同定及びその作用機構の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 北詰晶子、坂本直哉、奥野友紀子、筬島裕子、中川美奈、柿沼晴、植山真由美、小野塚泉、船岡祐介、渡辺貴子、幾世橋佳、新田沙由梨、村川美也子、萩原正敏、渡辺守
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京(一般口演, O-156)
  • 年月日: 2011-06-03
• [学会発表] 蛍光蛋白発現HCV培養系を用いたHigh-content screening assayの樹立及びHCVエントリー阻害剤探索への応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 北詰晶子、坂本直哉、奥野友紀子、筬島裕子、中川美奈、柿沼晴、植山真由美、小野塚泉、船岡祐介、渡辺貴子、幾世橋佳、新田沙由梨、村川美也子、萩原正敏、渡辺守
  • 学会等名: 第47回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京(一般口演, O-164)
  • 年月日: 2011-06-03
• [学会発表] Ezetimibe and interferon synergistically suppress subgenomic replication of hepatitis C virus via the acceleration of IFN-mediated ISG15 conjugation system (2010)
  • 著者名/発表者名: Masayoshi Yada, Ryoko Yada, Motoyuki Kojima, Kazuto Goto, Naoya Sasamoto, Akihide Masumoto and Makoto Nakamuta
  • 学会等名: Asian Pacific Association for the Study of the Liver(APASL) The 7th Single Topic Conference
  • 発表場所: Chiba, Japan
  • 年月日: 2010-12-17
• [学会発表] 蛍光タグ付加HCV培養系を用いたウイルスライフサイクルの解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 山本満千、坂本直哉、中川美奈、柿沼晴、東正新、加藤孝宣、脇田隆字、渡辺守
  • 学会等名: JDDW2010
  • 発表場所: 横浜(ポスター)
  • 年月日: 2010-10-13
• [学会発表] 細胞障害性HCV-JFH1subcloneの細胞培養系および感染動物モデルにおける機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 三島果子、坂本直哉、筬島裕子、中川美奈、柿沼晴、東正新、脇田隆字、今村道雄、茶山一彰、渡辺守
  • 学会等名: JDDW2010
  • 発表場所: 横浜(ポスター)
  • 年月日: 2010-10-13
• [学会発表] Identification of Novel Small Molecules Inhibitors of Hepatitis C Virus Replication Using a Cell-Based High-Throughput Screen. (2010)
  • 著者名/発表者名: Akiko Kusano-Kitazume, Naoya Sakamoto, Yuko Sekine-Osajima, Seishin Azuma, Mina Nakagawa, Sei Kakinuma, Yuki Nishimura-Sakurai, Yukiko Okuno, Masatoshi Hagiwara, and Mamoru Watanabe
  • 学会等名: 17th International Meeting on Hepatitis C Virus & Related Viruses
  • 発表場所: Yokohama, Japan
  • 年月日: 2010-09-09
• [学会発表] 蛍光タグ付加HCV培養系を用いたウイルスライフサイクルの解析.(一般口演) (2010)
  • 著者名/発表者名: 山本満千、坂本直哉、中川美奈、柿沼晴、東正新、加藤孝宣、脇田隆字、渡辺守
  • 学会等名: 第46回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2010-05-27
• [学会発表] HCVレプリコン系を用いた抗ウイルス小分子の大規模スクリーニング.(ポスター) (2010)
  • 著者名/発表者名: 北詰晶子、坂本直哉、筬島裕子、中川美奈、東正新、柿沼晴、渡辺守
  • 学会等名: 第46回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2010-05-27